Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-RRM1 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P23921

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RRM1

• O RRM1 é a subunidade grande da ribonucleotideo redutase (RNR), uma enzima heterodimérica essencial para a síntese de novo de difosfatos de desoxirribonucleosídeo (dNDPs) a partir de difosfatos de ribonucleosídeo (rNDPs), fornecendo os precursores monoméricos necessários para a replicação e reparo do DNA.
• Ele funciona como uma enzima alostérica, com atividade regulada pela ligação de ATP e especificidade de substrato nucleotídico controlada pela ligação de dATP, dGTP ou dTTP ao sítio de especificidade.
• O RRM1 deve se complexar com uma subunidade pequena (RRM2 ou p53R2) para formar a holoenzima ativa; a subunidade grande contribui com os sítios catalíticos e regulatórios alostéricos.
• Subcelularmente, o RRM1 está principalmente no citoplasma, onde ocorrem o metabolismo de nucleotídeos e a síntese de precursores do DNA.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que podem modular a atividade enzimática, a estabilidade ou as interações proteína-proteína.
• Mutações no RRM1 estão associadas a síndromes de depleção do DNA mitocondrial autossômicas recessivas, incluindo oftalmoplegia externa progressiva, destacando seu papel essencial na manutenção de pools equilibrados de dNTP para a síntese do DNA mitocondrial.
• A proteína pertence à família da ribonucleotideo redutase classe I e compartilha homologia estrutural com as subunidades grandes de RNR bacterianas e eucarióticas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Com base no imunógeno (região C-terminal aa 593-792), espera-se que o anticorpo reconheça a proteína RRM1 de comprimento total (~90 kDa) e pode detectar isoformas ou produtos de clivagem; inclua marcadores de peso molecular e controles apropriados.
• Para Western blotting, use condições otimizadas de carregamento e transferência para alvos de alto peso molecular; considere quimioluminescência aumentada e tempos de exposição prolongados.
• Na imunofluorescência/ICC, espera-se localização citoplasmática; fixe e permeabilize as células adequadamente (por exemplo, 4% de PFA seguido de permeabilização com Triton X-100) para garantir o acesso do anticorpo.
• Para imunoprecipitação, confirme a compatibilidade com seu tampão de lise e condições de eluição; execute um lisado de controle positivo (por exemplo, HeLa ou HEK293) para verificar a eficiência de captura.
• O anticorpo apresenta reatividade com humano e camundongo; se testar outras espécies, valide a reatividade cruzada devido à possível divergência de sequência no epítopo alvo.

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