Anti-RSK2 / RPS6KA3 Anticorpo Monoclonal de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - P51812

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RSK2

• RSK2 (Proteína quinase S6 ribossomal alfa-3), também conhecida como RPS6KA3, p90RSK3, MAPKAPK1B e ISPK-1, é uma serina/treonina proteína quinase codificada pelo gene RPS6KA3 no cromossomo X humano. Pertence à família de quinases AGC e contém dois domínios de quinase conectados por uma região de ligação.
• Agindo a jusante da cascata de sinalização ERK/MAPK, o RSK2 fosforila diretamente o fator de transcrição CREB1 e a histona H3 no Ser-10 após estimulação com EGF, desencadeando a expressão imediata de genes (PubMed:10436156, 9770464).
  Referências relacionadas: PMID:10436156 PMID:9770464
• O RSK2 promove a sobrevivência celular ao fosforilar e inativar os fatores pró-apoptóticos BAD e DAPK1, suprimindo assim suas funções apoptóticas (PubMed:16213824).
  Referências relacionadas: PMID:16213824
• Através da fosforilação da proteína ribossomal S6 (RPS6) e do fator de iniciação de tradução EIF4B, o RSK2 aumenta a tradução dependente de capa em resposta à insulina e mitógenos (PubMed:17360704, 18508509, 18813292).
  Referências relacionadas: PMDS:17360704 PMID:18508509 PMID:18813292
• O RSK2 integra sinais de nutrientes e crescimento ao fosforilar TSC2 e RPTOR, reguladores chave do mTORC1, modulando assim a sinalização mTOR de forma independente da via PI3K/AKT (PubMed:18722121).
  Referências relacionadas: PMID:18722121
• Localizado tanto no núcleo quanto no citoplasma, o RSK2 é expresso em muitos tecidos, com os níveis mais altos encontrados no músculo esquelético.
• Mutações no RPS6KA3 estão associadas à síndrome de Coffin-Lowry (CLS), uma deficiência intelectual ligada ao X caracterizada por retardo psicomotor e anormalidades esqueléticas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 600-700 do RSK2 humano, uma região conservada entre humanos, camundongos e ratos, o que apoia a reatividade cruzada observada. Para Western blot, espera-se uma banda em aproximadamente 84 kDa; considere o uso de amostras reduzidas e carregamento de 20-30 µg de lisado celular. Valide a especificidade da banda usando controles positivos apropriados (por exemplo, células HeLa, A431 ou NIH/3T3) e controles negativos (por exemplo, lisados com knockout de RSK2 ou amostras tratadas com siRNA).
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), é recomendada a recuperação de antígeno mediada por calor com tampão citrato (pH 6,0). Titule o anticorpo primário começando com uma diluição de 1:50-1:200 e otimize a detecção com um sistema de HRP baseado em polímero. Inclua sempre controles de isotipo e seções de tecido conhecidas por expressar RSK2.
• Em aplicações de ELISA, considere revestir com proteína recombinante RSK2 ou peptídeo e use um protocolo padrão de ELISA indireto. A concentração de trabalho ideal do anticorpo deve ser determinada empiricamente por titulação em xadrez (checkerboard).

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