Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-RUNX2 para WB, IP, ELISA - Q13950

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RUNX2

• O fator de transcrição relacionado a Runt 2 (RUNX2), também conhecido como Proteína de leucemia mieloide aguda 3 (AML3), Subunidade alfa-1 do fator de ligação ao núcleo (CBFA1) e Fator de transcrição específico de osteoblasto 2 (OSF2), é um fator de transcrição que se liga ao DNA.
• O RUNX2 é um regulador mestre da diferenciação osteoblástica e da morfogênese esquelética, essencial para a maturação dos osteoblastos e para a ossificação intramembranosa e endocondral. Referências relacionadas: PMID:28505335, PMID:28703881, PMID:28738062
• Ele se liga à sequência consenso central 5'-PYGPYGGT-3' em intensificadores e promotores de genes críticos para a osteogênese e hematopoiese, incluindo osteocalcina, osteopontina, sialoproteína óssea, colágeno alfa 1(I), LCK, IL-3 e GM-CSF.
• Nos osteoblastos, o RUNX2 sinergiza com o SPEN/MINT para aumentar a ativação mediada por FGFR2 do elemento responsivo a FGF da osteocalcina (OCFRE) e inibe a ativação transcricional dependente de KAT6B.
• Subcelularmente, o RUNX2 localiza-se tanto no núcleo quanto no citoplasma.
• Sua expressão é altamente específica para osteoblastos, refletindo seu papel fundamental na formação óssea.
• O RUNX2 sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, metilação e ubiquitinação, que regulam sua atividade e estabilidade, e está associado a variantes de doença ligadas à displasia esquelética.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 336–439 dentro da região C-terminal do RUNX2 humano; o reconhecimento do epítopo pode ser influenciado por modificações pós-traducionais ou contexto conformacional neste domínio.
• Para Western blot, use lisados celulares totais de linhagens de células semelhantes a osteoblastos (por exemplo, Saos‑2, MG‑63) ou culturas diferenciadas em osteoclastos, e espere uma banda predominante próxima a 57 kDa; valide com controles de carga apropriados.
• Na imunoprecipitação, titule a quantidade de anticorpo contra uma quantidade fixa de lisado e otimize as condições do tampão de lise (por exemplo, RIPA com inibidores de protease/fosfatase) para preservar as interações proteicas.
• Para ELISA, considere usar um fragmento recombinante de RUNX2 abrangendo a sequência do imunógeno como padrão; verifique a reatividade cruzada com amostras de camundongo se aplicado a modelos de doença em roedores.
• A reatividade cruzada com camundongo permite estudos comparativos em culturas de osteoblastos murinos ou modelos ósseos transgênicos, mas sempre verifique o desempenho no tipo específico de tecido ou célula de interesse.

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