Anticorpo monoclonal de coelho anti-SAFB para WB, IHC-P, ELISA - Q15424

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da SAFB

• A SAFB (fator B1 de ligação à matriz nuclear), também conhecida como proteína de ligação HSP27 ERE-TATA, HAP, HET ou SAFB1, é uma proteína nuclear produzida por splicing alternativo que atua como correpressora do receptor de estrogênio e fator de ligação ao DNA/RNA.
• Ela se liga ao DNA da região de ligação ao arcabouço/matriz (S/MAR) e forma um complexo “transcriptossomal” contendo proteínas SR e RNA polimerase II, conectando a transcrição ao processamento do RNA (PubMed:9671816). Referências relacionadas: PMID:9671816
• A SAFB atua como correpressora do receptor de estrogênio e pode se ligar ao promotor de HSP27 para reduzir sua transcrição, regulando negativamente a proliferação celular (PubMed:12660241). Referências relacionadas: PMID:12660241
• Quando associada à RBMX, a SAFB se liga ao promotor de SREBF1 e estimula sua transcrição (por similaridade).
• A localização subcelular é nuclear.
• É expressa ubiquamente, com níveis elevados no sistema nervoso central e níveis baixos no fígado; também é expressa em muitas linhagens celulares de câncer de mama.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, metilação, fosforilação e conjugação com ubiquitina (ligação isopeptídica), conforme indicado pelas palavras-chave.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante que abrange a região C-terminal (aminoácidos 815-915) da SAFB humana. Essa região pode contribuir para a especificidade do anticorpo; a reatividade cruzada com isoformas da SAFB ou proteínas relacionadas deve ser avaliada no sistema de amostra relevante.
• Para Western blot, a SAFB tem peso molecular previsto de aproximadamente 103 kDa; considere utilizar um gel de SDS-PAGE de baixa porcentagem (por exemplo, 8%) e condições de transferência apropriadas para proteínas de alto peso molecular.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), as condições ideais de recuperação antigênica e detecção podem variar. Valide o anticorpo em tecidos positivos conhecidos, como cortes do SNC humano ou linhagens celulares de câncer de mama.
• Em aplicações de ELISA, determine empiricamente o antígeno de revestimento ideal e as diluições do anticorpo.

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