Anticorpo Monoclonal Anti-SAMHD1 para WB, IHC-P, ELISA - Q9Y3Z3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SAMHD1

• SAMHD1 (proteína 1 contendo domínios SAM e HD) também é conhecido como DCIP, CHBL2, HDDC1, MOP-5, SBBI88 e hSAMHD1. É uma desoxinucleosídeo trifosfato triphosphohydrolase com papéis fundamentais na restrição antiviral e reparo do DNA.
• O SAMHD1 funciona como um fator de restrição do hospedeiro ao depletar os pools celulares de dNTP por meio da sua atividade dNTPase, bloqueando assim a transcrição reversa de retrovírus como o HIV-1 em células dendríticas e mieloides (PubMed:19525956, PubMed:21613998, PubMed:21720370). Referências relacionadas: PMID:19525956 PMID:21613998 PMID:21720370
• Além dos retrovírus, o SAMHD1 restringe os retrotransposões LINE-1, ligando-o à manutenção da estabilidade genômica (PubMed:24035396, PubMed:24217394, PubMed:29610582). Referências relacionadas: PMID:24035396 PMID:24217394 PMID:29610582
• A fosforilação no resíduo Thr-592 atua como um interruptor molecular: ela inibe a atividade dNTPase e a função antiviral, ao mesmo tempo que promove a resseccção do terminal do DNA em forquilhas de replicação paradas por meio da ativação de MRE11 (PubMed:23601106, PubMed:23602554, PubMed:29670289). Referências relacionadas: PMID:23601106 PMID:23602554 PMID:29670289
• O SAMHD1 se localiza predominantemente no núcleo e se associa aos cromossomos, o que é consistente com seu papel no reparo do DNA e processamento de forquilhas de replicação.
• É amplamente expresso em tecidos como coração, músculo esquelético, baço, fígado, intestino delgado, placenta, pulmão e leucócitos do sangue periférico, mas está ausente no cérebro e timo (PubMed:11064105). Referências relacionadas: PMID:11064105
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e formação de ligação isopeptídica; mutações no SAMHD1 estão associadas à síndrome de Aicardi-Goutières, uma interferonopatia do tipo I.
• O SAMHD1 também aumenta a hipermutação das imunoglobulinas em linfócitos B ao promover mutações de transversão (Por similaridade).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 527-626 do SAMHD1 humano, uma região que contém o sítio de fosforilação regulatório Thr-592. Os usuários devem considerar o status de fosforilação do SAMHD1 no seu sistema experimental, pois isso pode influenciar a ligação do anticorpo; recomenda-se a validação em tipos de células relevantes ou sob estímulos específicos.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de 72 kDa. Use condições desnaturantes adequadas e inclua controles positivos (por exemplo, lisados de THP-1, HeLa ou baço) para confirmar a especificidade da banda.
• Para imunohistoquímica em parafina (IHC-P), a recuperação de antígeno (por meio de calor ou enzimática) provavelmente é necessária. Teste em tecidos conhecidos por expressar SAMHD1 (por exemplo, baço, fígado) e inclua controles de isótipo.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; recomenda-se o pareamento adequado e a otimização da concentração. Realize a validação cruzada com a fonte de antígeno pretendida.
• Dados os papéis do SAMHD1 na defesa antiviral e resposta ao dano do DNA, os pesquisadores podem avaliar sua expressão após estimulação por interferon ou estresse de replicação.

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