Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-SARS-CoV-2 NSP16 para WB, ELISA - P0DTD1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da NSP16

• A NSP16 é o domínio 2'-O-metiltransferase da poliproteína replicase 1ab do SARS-CoV-2, responsável pela metilação da estrutura da capa 5' dos mRNAs virais. Referências relacionadas: PMID:35944563
• A atividade de metilação é crucial para a evasão imunológica, permitindo que os mRNAs virais evitem o reconhecimento pelos fatores de restrição do hospedeiro IFIT1 e IFIT3. Referências relacionadas: PMID:35944563 PMID:36722972 PMID:36285486
• A NSP16 requer uma capa de guanosina N7-metilada no substrato de mRNA para a ligação e atividade enzimática. Referências relacionadas: PMID:35944563
• Ela também pode interferir no splicing do mRNA do hospedeiro ao interagir com domínios de reconhecimento de pré-mRNA dos snRNAs U1 e U2 no núcleo. Referências relacionadas: PMID:33080218
• A localização subcelular inclui o citoplasma do hospedeiro, a região perinuclear e o núcleo, o que é consistente com seus papéis na replicação viral e manipulação do hospedeiro.
• Como parte do complexo de replicação-transcrição viral, a NSP16 é essencial para a produção de mRNAs virais maduros competentes para tradução.
• A poliproteína é processada por proteases virais em 16 proteínas não estruturais; a NSP16 constitui o domínio C-terminal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre os aminoácidos 236–290 da NSP16, uma região que pode estar exposta em condições desnaturantes, o que suporta seu uso em Western blot.
• Valide o anticorpo em lisados de células infectadas por SARS-CoV-2 ou na proteína NSP16 recombinante para confirmar a especificidade.
• Para ELISA, considere o pareamento com um anticorpo de captura ou detecção adequado; realize titulação para otimizar as relações sinal-ruído.
• Como o peso molecular previsto da NSP16 é de aproximadamente 33 kDa, confirme o tamanho da banda observada nas condições experimentais, tendo em mente possíveis modificações pós-traducionais ou intermediários de processamento.
• Inclua controles positivos e negativos adequados para distinguir o sinal específico do ruído de fundo.

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