Anticorpo policlonal anti-NSP3 do SARS-CoV-2 para WB, ELISA - P0DTD1

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da NSP3 do SARS-CoV-2

• A NSP3 do SARS-CoV-2 é um componente da poliproteína replicase 1ab (também conhecida como poliproteína ORF1ab), que é clivada por sua própria atividade de protease semelhante à papaína para liberar a proteína NSP3.
• A NSP3 possui atividade de protease semelhante à papaína (PL-PRO), responsável pelas clivagens na região N-terminal da poliproteína, e coopera com a NSP4 para formar vesículas de dupla membrana (DMVs) para a replicação viral (PubMed:35551511). Referências relacionadas: PMID:35551511
• Ela antagoniza a indução da imunidade inata do interferon do tipo I ao bloquear a fosforilação, a dimerização e a translocação nuclear do IRF3 do hospedeiro (PubMed:32733001), além de impedir a sinalização do NF-kappa-B (por similaridade). Referências relacionadas: PMID:32733001
• A NSP3 atua como uma enzima desubiquitinante e desISGilante, processando cadeias de poliubiquitina ligadas a Lys-48 e Lys-63, e removendo preferencialmente o ISG15 de IFIH1/MDA5 (PubMed:32726803, PubMed:33727702). Referências relacionadas: PMID:32726803, PMID:33727702
• A proteína apresenta atividade hidrolase de ADP-ribose, removendo mono-ADP-ribose das proteínas do hospedeiro, provavelmente interferindo nas defesas imunes mediadas por PARP do hospedeiro (provável) (PubMed:37242344). Referências relacionadas: PMID:37242344
• A localização subcelular inclui o citoplasma do hospedeiro, a membrana do retículo endoplasmático e as vesículas de dupla membrana, em consonância com seu papel na formação de organelas de replicação.
• As palavras-chave incluem imunoevasão viral, inibição da resposta imune inata do hospedeiro e atividade desubiquitinase, destacando seu papel multifuncional na interação entre hospedeiro e vírus.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1-200 da NSP3 (YP_009725299.1), uma região dentro do domínio N-terminal; isso pode capturar epítopos importantes para suas funções de protease ou de ligação à ADP-ribose.
• Para Western blot (WB), considere o uso de lisados celulares totais de células infectadas com SARS-CoV-2, mas valide a banda esperada (aproximadamente 794 kDa para a poliproteína completa ou para o fragmento de NSP3 clivado) em seu sistema específico.
• As aplicações em ELISA podem ser desenvolvidas utilizando este anticorpo policlonal como reagente de captura ou detecção; a combinação com um anticorpo monoclonal pode melhorar a especificidade.
• A reatividade cruzada foi confirmada com SARS-CoV-2; recomenda-se testar com outros coronavírus, se necessário.

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