Anticorpo Policlonal Anti-Spike ECD do SARS-CoV-2 para WB, ELISA - P0DTC2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Glicoproteína Spike do SARS-CoV-2

• A glicoproteína spike (S, E2, proteína peplômero) é uma proteína de fusão viral classe I que media a entrada do SARS-CoV-2 nas células hospedeiras ao se ligar ao receptor ACE2 (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086). Referências relacionadas: PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086
• Após a ligação ao receptor, a clivagem no sítio S2/S2' pelas proteases do hospedeiro TMPRSS2 ou catepsina L (CSTL) desencadeia a fusão de membrana, seja na superfície celular ou dentro de endossomos (PubMed:32142651, PubMed:32703818, PubMed:34159616). Referências relacionadas: PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616
• A proteína spike também pode usar receptores alternativos, como NRP1/NRP2 e integrinas, contribuindo para o tropismo por células epiteliais olfatórias e vias de entrada independentes de ACE2 (PubMed:33082293, PubMed:33082294, PubMed:35150743). Referências relacionadas: PMID:33082293 PMID:33082294 PMID:35150743
• O ectodomínio da spike (ECD) compreende a subunidade de ligação ao receptor S1 e a subunidade de fusão S2, com dobradiças flexíveis no pedúnculo que permitem orientação dinâmica (PubMed:32817270). Referências relacionadas: PMID:32817270
• Subcelularmente, a proteína spike é encontrada na membrana do virião, na membrana do compartimento intermediário retículo endoplasmático-Golgi do hospedeiro e na membrana da célula hospedeira.
• A proteína é altamente glicosilada e palmitoilada, apresentando ligações dissulfeto e regiões de alfa-hélice enrolada características da maquinaria de fusão viral.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi uma proteína de fusão recombinante cobrindo todo o domínio extracelular (aminoácidos 11–1208), tornando o anticorpo adequado para detectar formas de spike ECD de comprimento total e solúveis.
• Para Western blot em condições redutoras, considere usar um tampão de amostra desnaturante com β-mercaptoetanol ou DTT, pois a proteína spike contém múltiplas ligações dissulfeto.
• Este anticorpo é validado para ELISA, potencialmente adequado para captura de antígeno spike ou ensaios de ligação; a otimização das condições de revestimento e bloqueio é recomendada.

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