Anticorpo Policlonar de Coelho Anti-Spike SARS-CoV-2 para WB - P0DTC2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Spike do SARS-CoV-2

• A glicoproteína Spike (S) do SARS-CoV-2, também conhecida como E2 ou proteína peplômera, é uma proteína de fusão viral classe I que medeia a entrada do vírus nas células hospedeiras e é um alvo principal para anticorpos neutralizantes.
• A proteína S liga o virion à célula hospedeira ao se ligar ao receptor da enzima conversora de angiotensina 2 (ACE2), iniciando a infecção.
  Referências relacionadas:
  PMID:32142651
  PMID:32155444
  PMID:33607086
• Receptores de entrada alternativos incluem a neuropilina-1/2 (NRP1/NRP2) e a integrina, que contribuem para o tropismo tecidual; por exemplo, o uso de NRP1/NRP2 explica o tropismo viral em células epiteliais olfatórias com baixa expressão de ACE2.
  Referências relacionadas:
  PMID:33082294
  PMID:33082293
  PMID:35150743
• O precursor da Spike de comprimento total (~141 kDa) é processado proteoliticamente nas subunidades S1 e S2. Após a ligação ao receptor, a clivagem de S2' por proteases do hospedeiro como TMPRSS2 ou catepsina L desencadeia alterações conformacionais irreversíveis que fundem as membranas viral e celular.
  Referências relacionadas:
  PMID:32142651
  PMID:32703818
  PMID:34159616
  PMID:34561887
• A proteína S se localiza na membrana do virion, na membrana do compartimento intermediário retículo endoplasmático-Golgi (ERGIC) do hospedeiro e na membrana da célula hospedeira.
• As principais características estruturais incluem glicosilação ligada a N, palmitoilação, uma âncora transmembranar e repetições de heptade em bobina enrolada estabilizadas por pontes dissulfeto.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O peptídeo imunógeno (aminoácidos 600–700) abrange a junção S1/S2; portanto, o anticorpo pode detectar tanto a Spike de comprimento total (~141 kDa) quanto a subunidade S2 em condições redutoras. Considere testar SDS-PAGE redutor e não redutor para Western blot.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), as condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas para sua linhagem celular ou tecido alvo, pois a localização da Spike (superfície vs. intracelular) depende do contexto de expressão.
• No ELISA, este anticorpo pode ser avaliado como reagente de captura ou detecção; o pareamento com um anticorpo monoclonal anti-Spike pode melhorar a especificidade do ensaio.
• Para imunoprecipitação (IP), valide a capacidade do anticorpo de precipitar complexos nativos da Spike no sistema de amostra relevante, pois a integridade conformational pode afetar a ligação.
• O Dot blot (DB) pode servir como ferramenta de triagem rápida; no entanto, a sensibilidade deve ser comparada com métodos quantitativos como o ELISA para análise definitiva.
• A reatividade cruzada está confirmada para o SARS-CoV-2; a reatividade com proteínas Spike de outros coronavírus (por exemplo, SARS-CoV, MERS-CoV) não foi determinada e deve ser testada se necessário.

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