Anticorpo Policlonais Anti-SARS-CoV-2 Spike RBD para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P0DTC2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Glicoproteína Spike

• A glicoproteína spike (S) é uma proteína de fusão precursora que medeia a entrada viral ao se ligar ao receptor hospedeiro ACE2 e Triggerar a fusão da membrana. Referências relacionadas: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• Após a clivagem, a subunidade S2 expõe peptídeos de fusão para a fusão direta com a membrana celular; alternativamente, a S não clivada leva à endocitose e fusão pelas vias endossomais. Referências relacionadas: PMID:34561887, PMID:32075877, PMID:32221306
• Receptores alternativos do hospedeiro incluem NRP1/NRP2, integrinas e ASGR1, permitindo entrada independente de ACE2 e contribuindo para o tropismo tecidual. Referências relacionadas: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• A proteína S é clivada pelas proteases do hospedeiro TMPRSS2 ou catepsina L (CSTL) durante a entrada, Triggerando alterações conformacionais irreversíveis. Referências relacionadas: PMID:32703818, PMID:34159616
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, ligações dissulfeto e palmitoilação, que são críticas para a estrutura e função.
• Localização subcelular: membrana do vírion, membrana do compartimento intermediário ER-Golgi do hospedeiro e membrana da célula hospedeira.
• Contém um domínio de ligação ao receptor (RBD) dentro da subunidade S1 que interage diretamente com o ACE2, tornando-o um alvo chave para anticorpos neutralizantes.
• Pode atuar como superantígeno e inibir as respostas imunes inatas do hospedeiro, contribuindo para a imunoevasão viral.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende o domínio de ligação ao receptor (aa 332-550) da proteína spike do SARS-CoV-2, tornando este anticorpo adequado para detectar o RBD em ensaios como western blotting (WB), ELISA e imunoprecipitação (IP).
• Para imunofluorescência (IF/ICC), considere validar o anticorpo em linhagens celulares infectadas ou células transfectadas com a proteína spike em condições adequadas de fixação e permeabilização.
• Como anticorpo policlonal, ele pode reconhecer múltiplos epítopos no RBD; realize a titulação e inclua controles adequados (ex.: lisados celulares negativos, controles de isotipo) para garantir a especificidade.
• A reatividade cruzada é relatada para o SARS-CoV-2; a reatividade com outros coronavírus ou variantes deve ser confirmada experimentalmente.
• O peso molecular previsto da proteína spike completa é de aproximadamente 141 kDa; no entanto, as formas clivadas ou glicosiladas podem migrar de forma diferente; considere executar um controle positivo.

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