Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Spike S1 do SARS-CoV-2 para WB, ELISA - P59594

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Glicoproteína Spike (S1)

• Identidade da proteína: A glicoproteína spike do SARS-CoV, também conhecida como E2 ou proteína peplómero, é uma proteína de fusão viral de classe I de 139 kDa essencial para a entrada do vírus.
• Aderência e entrada: A subunidade S1 media a aderência aos recetores da célula hospedeira (por exemplo, ACE2 humano e CLEC4M/DC-SIGNR), iniciando a infeção e subsequente internalização do vírus nos endossomas.
• Fusão: Após endocitose, a proteólise mediada pela catepsina CTSL expõe o péptido de fusão em S2, levando à fusão da membrana entre o virião e as membranas celulares do hospedeiro.
• Mecanismo fusogénico: A proteína transita por pelo menos três estados conformacionais — nativo pré-fusão, intermediário pré-hairpin e hairpin pós-fusão — onde as regiões coiled-coil formam uma estrutura de trímero-de-hairpins para promover a aproximação das membranas.
• Péptido de fusão viral: Uma região curta dentro de S2, exposta após clivagem, insere-se diretamente nas membranas do hospedeiro para promover a fusão.
• Evasão imunitária: Regula negativamente a tetherina do hospedeiro (BST2) via degradação lisossomal para contrariar a atividade antiviral.
• Localização subcelular: Presente na membrana do virião, na membrana do compartimento intermédio retículo endoplasmático-Golgi do hospedeiro e na membrana da célula hospedeira; classificada como uma proteína do envelope viral e uma proteína transmembranar de hélice.
• Modificações-chave: Glicoproteína com ligações dissulfureto, palmitoilação (lipoproteína) e um péptido sinal; características estruturais incluem domínios coiled-coil essenciais para a fusão.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um péptido sintético que abrange os aminoácidos 1–100 no N-terminal da subunidade S1; a população de anticorpos resultante pode reconhecer epítopos lineares dentro desta região, incluindo potenciais locais de glicosilação.
• Para Western blotting, considere usar condições redutoras e não redutoras para avaliar o impacto das ligações dissulfureto na disponibilidade do epitopo, e valide com lisados de células infetadas por SARS-CoV ou proteína spike recombinante.
• Em aplicações de ELISA, a natureza policlonal confere avididade; teste tanto os formatos diretos como de captura, e inclua antigénios de controlo apropriados (por exemplo, S1 recombinante, trímero S) para confirmar a especificidade.
• A reatividade cruzada relatada com SARS-CoV sugere um potencial reconhecimento amplo entre coronavírus relacionados; pode ser necessária validação adicional com variantes da proteína spike do SARS-CoV-2.

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