Anticorpo Policlonico Anti-Pico Spike SARS-CoV para WB e ELISA - P59594

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína Spike do SARS-CoV

• A glicoproteína Spike do SARS-CoV (também conhecida como E2 ou proteína peplômera) é codificada pelo gene S e tem um peso molecular de aproximadamente 139 kDa. É uma proteína de fusão viral classe I essencial para a entrada do SARS-CoV.
• A proteína liga o virion aos receptores da célula hospedeira, principalmente o ACE2 humano e o CLEC4M/DC-SIGNR, iniciando a infecção. Após a ligação ao receptor, o vírus é internalizado nos endossomos.
• A acidificação endossomal aciona a proteólise pela catepsina L (CTSL), que cliva a proteína Spike e desmascara o peptídeo de fusão na subunidade S2, ativando a fusão membranar.
• A Spike medeia a fusão das membranas viral e do hospedeiro por meio de uma estrutura de trímero de grampos formada pelas regiões de repetição heptádica. Essa mudança conformacional impulsiona a aproximação e a fusão das membranas.
• Além disso, a Spike pode reduzir a expressão da tetherin hospedeira (BST2), direcionando-a para degradação lisossomal, neutralizando assim a resposta imunológica inata do hospedeiro.
• Subcelularmente, a proteína Spike é encontrada na membrana do virion, na membrana do compartimento intermediário retículo endoplasmático-Golgi do hospedeiro e na membrana da célula hospedeira.
• Palavras-chave associadas à proteína incluem proteína do envelope viral, interação hospedeiro-vírus, imunoevasão viral e penetração viral no citoplasma do hospedeiro, refletindo seu papel multifacetado na infecção.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético dos aminoácidos 600–700 da proteína Spike (NP_828851.1), que se encontra na subunidade S2. Espera-se que este anticorpo detecte tanto a Spike de comprimento total quanto o produto de clivagem S2.
• Para Western blot (WB), pode ser observada uma banda próxima a 139 kDa correspondente à Spike de comprimento total, e sob condições redutoras, fragmentos S2 também podem aparecer. Recomenda-se o uso de controles positivos adequados, como lisados de células infectadas por SARS-CoV ou proteína Spike recombinante.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado para captura ou detecção da proteína Spike do SARS-CoV. Otimize as condições de recobrimento e bloqueio, e valide a especificidade contra outros coronavírus conforme necessário.
• Por se tratar de um anticorpo policlonico, ele pode apresentar variabilidade entre lotes. Recomenda-se titular o anticorpo para cada aplicação e confirmar o desempenho no sistema de amostras relevante.

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