Anticorpo Policlonais Anti-SARS-CoV Spike RBD para WB, ELISA - P59594

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do RBD da Spike do SARS-CoV

• A glicoproteína Spike do SARS-CoV (também conhecida como E2 ou proteína Peplômera) é codificada pelo gene S e é essencial para a entrada do vírus nas células hospedeiras.
• Ela medeia a ligação viral ao se ligar aos receptores hospedeiros, a enzima conversora de angiotensina 2 (ACE2) e CLEC4M/DC-SIGNR, desencadeando a internalização do virion em endossomos.
• Após a ligação ao receptor e ativação proteolítica por catepsinas do hospedeiro, a proteína Spike atua como uma proteína de fusão viral de classe I, promovendo a fusão entre as membranas viral e da célula hospedeira.
• O domínio de ligação ao receptor (RBD), localizado na subunidade S1, é diretamente responsável pela interação com o ACE2 e é um dos principais alvos para anticorpos neutralizantes.
• A proteína também apresenta funções imunomoduladoras, como a regulação negativa da tetherina hospedeira (BST2) por degradação lisossomal para neutralizar as respostas imunes inatas antivirais.
• Subcelularmente, a glicoproteína Spike se localiza na membrana do virion, no compartimento intermediário entre retículo endoplasmático e Golgi (ERGIC) da célula hospedeira e na membrana da célula hospedeira.
• Ela é extensivamente modificada pós-tradução, apresentando glicosilação, ligações dissulfeto e palmitoilação, que são críticas para sua estrutura e função.
• Palavras-chave adicionais: imunoevasão viral, inibição da resposta imune inata do hospedeiro e fator de virulência.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno usado para gerar este anticorpo é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 350-450 do RBD da Spike (baseado na acesso NP_828851.1); considere essa região do epítopo ao projetar ensaios de detecção.
• Este anticorpo policlonal é adequado para aplicações de Western blot (WB) e ELISA; os usuários devem otimizar os fatores de diluição e validar o desempenho nas suas matrizes de amostra específicas.
• Devido à reatividade cruzada observada com o SARS-CoV, o anticorpo também pode reconhecer proteínas Spike de cepas estreitamente relacionadas, mas a reatividade com outros coronavírus deve ser avaliada experimentalmente.
• Para detecção por WB, o peso molecular previsto da glicoproteína Spike de comprimento total é de aproximadamente 139 kDa, mas produtos de clivagem ou bandas de degradação podem ser observados dependendo do preparo da amostra.
• Em ELISA, o pareamento deste anticorpo com uma estratégia adequada de anticorpo de captura ou revestimento de antígeno direcionada ao RBD pode aumentar a sensibilidade do ensaio; considere realizar titulações preliminares em xadrez.

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