Anticorpo Monoclonal Anti-SDHA para WB, IF, ELISA - P31040

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SDHA

• O SDHA codifica a subunidade flavoproteica da succinato desidrogenase (SDH), um complexo enzimático (complexo II) da cadeia de transporte de elétrons mitocondrial que acopla a oxidação do succinato à redução da ubiquinona (PubMed:10746566, PubMed:24781757).
  Referências relacionadas:
  PMID:10746566 PMID:24781757

• A proteína também catalisa a oxidação do malato para enol-oxaloacetato, um potente inibidor da SDH que subsequentemente é isomerizado para ceto-oxaloacetato (Por similaridade).

• SDHA atua como supressor tumoral; mutações de perda de função estão associadas a paragangliomas e tumores do estroma gastrointestinal (PubMed:20484225).
  Referências relacionadas:
  PMID:20484225

• Localizado na membrana interna mitocondrial, o SDHA é essencial tanto para o ciclo do ácido tricarboxílico quanto para a fosforilação oxidativa.

• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que podem regular a atividade enzimática; a proteína também contém um cofator FAD ligado covalentemente.

• Clinicamente, as mutações do SDHA estão ligadas à síndrome de Leigh, cardiomiopatia e outras doenças mitocondriais primárias (palavras-chave: Variante de doença, Doença mitocondrial primária).

• Múltiplas variantes de transcripto que codificam diferentes isoformas foram identificadas (Splicing alternativo).

• A proteína tem massa molecular predita de 72,7 kDa, mas comumente migra a ~73 kDa em SDS-PAGE.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região C-terminal conservada (aa 550–650), sugerindo o reconhecimento de todas as isoformas humanas conhecidas de SDHA; verifique nos sistemas de amostras relevantes.

• Para Western blot, use condições redutoras e carregue quantidades adequadas de proteína; a banda esperada é de aproximadamente 73 kDa. Valide com um controle positivo, como lisados de células HeLa ou HEK293.

• Em ensaios de imunofluorescência, a coloração mitocondrial deve ser predominante; otimize a fixação (por exemplo, 4% de PFA) e permeabilização (por exemplo, 0,1% de Triton X-100) para obter o melhor sinal.

• Este anticorpo tem reatividade cruzada com SDHA de camundongo e rato, sendo adequado para estudos nessas espécies; confirme a reatividade no seu modelo testando lisados ou cortes de tecido.

• Para aplicações de ELISA, considere o pareamento com um anticorpo de detecção que reconheça um epítopo não sobreposto.

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