Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-SDHB para WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P21912

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SDHB

• O SDHB codifica a subunidade contendo ferro-enxofre (Ip) da succinato desidrogenase (SDH), também conhecida como complexo II da cadeia respiratória mitocondrial.
• O complexo SDH catalisa a oxidação de succinato em fumarato no ciclo do ácido tricarboxílico (TCA) e transfere elétrons para a ubiquinona por meio de seus agrupamentos ferro-enxofre (PubMed:26925370, PubMed:27604842). Referências relacionadas: PMID:26925370 PMID:27604842
• A proteína coordena os agrupamentos [2Fe-2S], [3Fe-4S] e [4Fe-4S], que medeiam o transporte de elétrons.
• O SDHB está ancorado na membrana interna da mitocôndria, com seu sítio ativo voltado para a matriz.
• Além do succinato, a SDH pode oxidar malato em enol-oxaloacetato, que atua como um potente inibidor do complexo (por similaridade).
• A acetilação e outras modificações pós-traducionais regulam a atividade da SDH, e as mutações no SDHB estão associadas a doenças mitocondriais primárias e síndromes hereditárias de paraganglioma/feocromocitoma (com base nas palavras-chave do UniProt: variante de doença, doença mitocondrial primária).
• A proteína também está relacionada a interações hospedeiro-vírus e é um alvo de identificação proteômica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região N-terminal (aa 29–280) do SDHB humano, que inclui a proteína madura após o processamento mitocondrial. Verifique a especificidade do anticorpo em frações mitocondriais ou no complexo II purificado.
• Na análise por Western blot, o SDHB migra a aproximadamente 31 kDa; utilize condições redutoras e considere a adição de inibidores de protease para evitar a degradação.
• Na imunofluorescência ou IHC, é necessária a permeabilização para acessar a membrana interna da mitocôndria; valide a coloração com um marcador mitocondrial.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com o SDHB de camundongo e rato; confirme a homologia da sequência caso utilize outras espécies.
• Para ELISA, associe-o a um sistema de captura/detecção validado, direcionado a um epítopo não sobreposto, caso esteja desenvolvendo um ensaio do tipo sanduíche.

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