Anticorpo policlonal de coelho anti-Sec23B para WB, IF/ICC, ELISA - Q15437

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Sec23B

• A Sec23B é uma proteína de transporte proteico, também conhecida como proteína B relacionada à SEC23, codificada pelo gene SEC23B. É um componente central do complexo de proteínas de revestimento II (COPII), que medeia a brotação de vesículas a partir do retículo endoplasmático (RE).
• Juntamente com a Sec24, a Sec23B forma a camada interna do revestimento COPII, promovendo a deformação física da membrana do RE em vesículas de transporte e o empacotamento seletivo das moléculas de carga destinadas ao complexo de Golgi.
• A Sec23B apresenta atividade de proteína ativadora de GTPase (GAP) em relação à pequena GTPase Sar1, essencial para a montagem e desmontagem do revestimento durante a formação das vesículas.
• A proteína é expressa ubiquamente nos tecidos humanos, ressaltando seu papel fundamental na via secretora e na biogênese de membranas.
• No nível subcelular, a Sec23B está localizada em vesículas citoplasmáticas, especificamente nas membranas de vesículas revestidas por COPII, na membrana do RE e no citosol.
• As modificações pós-traducionais incluem a acetilação; mutações no gene SEC23B estão associadas à anemia diseritropoiética congênita tipo II (CDAII), uma anemia hemolítica hereditária caracterizada por eritropoiese ineficaz e eritroblastos binucleados.
• A Sec23B possui peso molecular de aproximadamente 86 kDa e contém motivos de ligação ao zinco, sendo classificada como uma metaloproteína de zinco.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético derivado dos resíduos 150–250 da Sec23B humana, uma região conservada entre humanos, camundongos e ratos, o que sustenta a reatividade cruzada observada.
• Para Western blot (WB), deve ser detectada uma banda correspondente ao peso molecular previsto de 86 kDa. Considere testar uma faixa de diluições do anticorpo, por exemplo, de 1:500 a 1:2000, e valide o ensaio com controles positivos e negativos apropriados no seu sistema de amostras.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), espere um padrão de coloração consistente com a distribuição do RE e das vesículas COPII. Estudos de colocalização com marcadores de organelas, como marcadores do compartimento intermediário RE-Golgi, podem ajudar a confirmar a especificidade.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado para captura ou detecção. Realize titulações em tabuleiro de xadrez para determinar as concentrações ideais de revestimento e de anticorpo.
• Como a Sec23B é expressa ubiquamente, a maioria das linhagens celulares cultivadas, como HeLa, HEK293 e NIH/3T3, deve conter o alvo. Certifique-se de que o tampão de lise e o protocolo sejam compatíveis com proteínas associadas à membrana.

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