Anticorpo policlonal de coelho anti-SEC61B para WB, IF/ICC, ELISA - P60468

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da SEC61B

• A SEC61B codifica a subunidade beta do complexo translocon SEC61, um componente central da maquinaria de translocação de proteínas do retículo endoplasmático (RE). Referências relacionadas: PMID:12475939
• O complexo SEC61 forma um receptor de ribossomos e um poro regulado na membrana do RE, permitindo a importação cotraducional de polipeptídeos precursores que contêm peptídeos-sinal. Referências relacionadas: PMID:12475939
• Ele também medeia a inserção de proteínas transmembranares na membrana do RE, atuando em conjunto com o complexo translocon multipasse (MPT) para proteínas de membrana que atravessam múltiplas vezes a membrana. Referências relacionadas: PMID:32820719, PMID:36261522
• A SEC61B coopera com a proteína de translocação TRAM1 para facilitar a importação de proteínas nascentes para o RE. Referências relacionadas: PMID:19121997
• Subcelularmente, a SEC61B é um componente integral da membrana do retículo endoplasmático.
• A proteína sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, palmitoilação e fosforilação, que podem regular sua atividade ou estabilidade.
• Como elemento essencial na translocação de proteínas, a SEC61B está associada a processos como transporte de proteínas, translocação e organização da membrana do RE.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para Western Blot (WB), o peso molecular previsto da SEC61B é de aproximadamente 10 kDa. Utilize um gel de SDS-PAGE de 12-15% e otimize a transferência para uma membrana de PVDF com tamanho de poro de 0,2 µm para proteínas pequenas. Inclua controles positivos apropriados (por exemplo, lisados de HeLa, HEK293 ou tecidos que expressem SEC61B) e valide a especificidade do anticorpo com um peptídeo bloqueador ou uma amostra knockout.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), recomenda-se a fixação com PFA a 4%, seguida de permeabilização com Triton X-100 a 0,1%. Teste a concentração do anticorpo na faixa de 1:50–1:200 e confirme a localização no RE. A coloração conjunta com um marcador do RE (por exemplo, calnexina ou PDI) pode ajudar a verificar a especificidade.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser avaliado como reagente de captura ou detecção. Faça a titulação do anticorpo para determinar a concentração ideal de trabalho e valide com uma proteína SEC61B recombinante ou lisado celular. Certifique-se de realizar testes de reatividade cruzada com amostras de camundongo e rato para confirmar o desempenho.
• Por ser um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser monitorada. Considere aliquotar o produto após o recebimento e realizar um estudo-piloto para cada novo lote, a fim de manter a reprodutibilidade experimental.

CamelBio: sua ponte completa para aquisição

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