Anticorpo Monoclonal Anti-SERCA2/ATP2A2 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P16615

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SERCA2/ATP2A2

• SERCA2, codificado por ATP2A2, é uma ATPase transportadora de cálcio dependente de magnésio que acopla a hidrólise de ATP à translocação de íons cálcio do citosol para o lúmen do retículo sarcoplasmático/endoplasmático (PubMed:12542527, PubMed:16402920). Referências relacionadas: PMID:12542527 PMID:16402920
• Desempenha um papel fundamental na contração/relaxamento muscular, regulando os níveis de cálcio citosólico, e é essencial para a homeostase do cálcio em tecidos não musculares.
• SERCA2 possui três isoformas principais geradas por splicing alternativo: a isoforma 1 é amplamente expressa em músculo liso e tecidos não musculares; as isoformas 2 e 3 são predominantes no coração e no músculo esquelético de contração lenta.
• Em resposta à inanição, o SERCA2 se envolve na autofagia ao interagir com a VMP1 para controlar os contatos do RE com a membrana de isolamento para a formação do autofagossomo; também modula os contatos do RE com gotículas lipídicas, mitocôndrias e endossomos (PubMed:28890335). Referências relacionadas: PMID:28890335
• SERCA2 está localizado nas membranas do retículo endoplasmático e do retículo sarcoplasmático.
• É um regulador crítico da diferenciação dos osteoclastos via sinalização de Ca(2+) mediada por TNFSF11, interagindo com a TMEM64 para ativar a NFATC1 e a produção de ROS mitocondrial.
• Palavras-chave incluem: splicing alternativo, transporte de cálcio, ligação a ATP, magnésio, ligação a metal, transmembrana e ligação dissulfeto; modificações pós-traducionais incluem nitração e fosforilação.
• Especificidade tecidual: A isoforma 1 é mais alta no fígado, pâncreas, pulmão; intermediária no cérebro, rim, placenta; mais baixa no coração e músculo esquelético. As isoformas 2 e 3 são específicas do músculo cardíaco/de contração lenta.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O peptídeo imunogênico (aa 943-1042) tem como alvo a região C-terminal do SERCA2. Dada a alta similaridade de sequência entre as isoformas, considere a possível detecção de múltiplas isoformas dependendo do tipo de amostra.
• Para WB, uma banda esperada em torno de 115 kDa deve ser observada; valide a especificidade usando controles de nocaute ou experimentos de knockdown com siRNA.
• Para IF/ICC, otimize os protocolos de fixação e permeabilização para o tipo celular alvo; note que o SERCA2 se localiza nas membranas do RE/RS, portanto a coloração pode aparecer reticular.
• Em IP e ELISA, confirme o desempenho do anticorpo com proteína recombinante ou amostras endógenas; pode ser necessária titulação para evitar alto fundo.

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