Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-SERCA2/ATP2A2 para WB, IHC-P - P16615

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SERCA2/ATP2A2

• A ATPase 2 de cálcio do retículo sarcoplasmático/endoplasmático (SERCA2), também conhecida como bomba de cálcio 2, é codificada pelo gene ATP2A2 e pertence à família das ATPases de transporte de cátions do tipo P. O splicing alternativo gera várias isoformas com expressão específica por tecido.
• A SERCA2 é uma enzima dependente de magnésio que catalisa a hidrólise de ATP acoplada à translocação de íons cálcio do citosol para o lúmen do retículo sarcoplasmático ou endoplasmático, sendo essencial para a homeostase intracelular do cálcio. Referências relacionadas: PMID:12542527 PMID:16402920
• Essa bomba desempenha um papel fundamental no ciclo de contração/relaxamento das células musculares ao regular a recaptação de cálcio para o retículo sarcoplasmático.
• Além do músculo, a SERCA2 está envolvida na autofagia: após interagir com a VMP1, controla os contatos entre as membranas de isolamento do RE necessários para a formação do autofagossomo e modula os contatos com gotículas lipídicas, mitocôndrias e endossomos. Referências relacionadas: PMID:28890335
• Nos osteoclastos, a SERCA2 atua como reguladora da sinalização de cálcio mediada por TNFSF11 por meio da interação com TMEM64, promovendo a ativação de NFATC1 e a geração de ROS mitocondriais, processos fundamentais para a diferenciação dos osteoclastos.
• Subcelularmente, a SERCA2 está localizada na membrana do retículo endoplasmático e na membrana do retículo sarcoplasmático, refletindo seu papel no armazenamento e na sinalização intracelular de cálcio.
• A expressão nos tecidos varia: a isoforma 1 é amplamente expressa no músculo liso e em tecidos não musculares (com alta expressão no fígado, pâncreas e pulmão), enquanto as isoformas 2 e 3 são encontradas predominantemente no músculo cardíaco e no músculo esquelético de contração lenta.
• As principais modificações pós-traducionais incluem ligação a nucleotídeos, fosforilação e pontes dissulfeto; a proteína também está sujeita à nitração, conforme indicado por diversos estudos fosfoproteômicos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo policlonal foi produzido contra um fragmento recombinante que abrange os aminoácidos 111-253 da SERCA2/ATP2A2 humana (região conservada). Pode reconhecer várias isoformas e apresentar reação cruzada com a SERCA2 de camundongo e rato, conforme confirmado.
• Para Western blot, espere uma banda em torno de 115 kDa. Otimize as condições redutoras/não redutoras e considere controles de carregamento provenientes de tecidos com alta expressão de SERCA2 (por exemplo, fígado e coração).
• Para imuno-histoquímica (cortes de parafina), utilize métodos apropriados de recuperação antigênica e valide a coloração em tecidos que expressem SERCA2. Inclua controles de tecido positivos e negativos.
• Para aplicações de ELISA, use o imunógeno recombinante ou a proteína purificada como antígeno de revestimento. Verifique as condições de revestimento e a série de diluições do anticorpo.
• Como ocorre com qualquer anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada em ensaios quantitativos. Considere a realização de experimentos-piloto ao trocar de lote.

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