Anticorpo Policlonais Anti-SETD2 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q9BYW2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SETD2

• SETD2 é uma histona-lisina N-metiltransferase que trimetila especificamente a 'Lis-36' da histona H3 (H3K36me3), representando a principal enzima que gera essa marca para ativação transcricional epigenética. Ela pode utilizar H3K36 dimetilado como substrato e também metilar H3K36 não metilado in vitro. Referências relacionadas: PMID:16118227, PMID:19141475, PMID:21526191, PMID:19332550
• Desempenha um papel crítico na modulação da estrutura da cromatina durante o alongamento da transcrição ao coordenar o recrutamento do complexo FACT e interagir com a RNA polimerase II hiperfosforilada (POLR2A). Referências relacionadas: PMID:23325844
• Atua como regulador chave do reparo de incompatibilidade de DNA na fase G1 e início da fase S: a H3K36me3 gerada pelo SETD2 é necessária para recrutar a subunidade MSH6 do complexo MutS alfa para a cromatina, permitindo a rápida identificação de incompatibilidades. Referências relacionadas: PMID:23622243
• É necessário para o reparo de quebras duplas de DNA por recombinação homóloga; medeia a formação de H3K36me3 nos locais de quebra para promover o recrutamento de RAD51. Referências relacionadas: PMID:24843002
• Funciona como supressor tumoral, e a H3K36me3 também recruta a DNA metiltransferase DNMT3A para manter os estados heterocromáticos. Referências relacionadas: PMID:24509477, PMID:27317772
• O recrutamento de SETD2 e a formação de H3K36me3 são aumentados em genes que contêm íntrons, sugerindo acoplamento do splicing ao alongamento da transcrição. Referências relacionadas: PMID:21792193
• Além das histonas, medeia a metilação da alfa-tubulina (Lis-40) e do STAT1 (Lis-525), contribuindo para a mitose normal, a citocinese e a defesa antiviral induzida pelo interferon alfa. Referências relacionadas: PMID:27518565, PMID:28753426
• A localização subcelular é principalmente nuclear, associada aos cromossomos. É expresso ubiquitous em todos os tecidos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para detecção por western blot (WB), considere utilizar um gel de baixa porcentagem (ex: 6% ou gradiente) para resolver efetivamente a proteína SETD2 de alto peso molecular (~288 kDa).
• Na imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), métodos padrão de recuperação de antígeno e permeabilização podem ser necessários para um sinal ótimo; valide no seu sistema de amostra relevante.
• O peptídeo imunogênico mapeia para uma região C-terminal (aa 2475‑2564) do SETD2 humano; embora seja reativo cruzado com camundongo e rato, confirme a reatividade na sua espécie de interesse devido a possíveis variações de sequência.
• Para imunoprecipitação (IP), realize a pré-clareza de lisados e inclua controles de isótipo adequados para minimizar a ligação inespecífica.
• Sempre inclua controles positivos e negativos (ex: lisados com níveis conhecidos de expressão de SETD2) para validar a detecção na sua configuração experimental.

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