Anticorpo Policlonal Anti-SETD3 para WB, IP, ELISA - Q86TU7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SETD3

• O SETD3, também conhecido como hSETD3 ou C14orf154, é uma proteína contendo o domínio SET 3 codificada pelo gene SETD3.
• O SETD3 é uma actina-histidina N-metiltransferase que metila especificamente a actina na histidina-73 (His-73) para formar 3-metilhistidina (tele-metilhistidina). Esta atividade é crítica para a dinâmica adequada da actina. Referências relacionadas: PMID:30526847, PMID:30626964, PMID:30785395
• A metilação da histidina da actina pelo SETD3 é necessária para a contração do músculo liso, particularmente no útero em trabalho de parto durante o parto, destacando o seu papel em processos fisiológicos. Referências relacionadas: PMID:30626964
• A enzima exibe uma estrita especificidade de substrato; não possui atividade proteína-lisina N-metiltransferase e provavelmente metila apenas a actina na His-73, sublinhando o seu nicho funcional único. Referências relacionadas: PMID:30626964, PMID:30785395, PMID:31388018
• O SETD3 localiza-se tanto no citoplasma como no núcleo, sugerindo possíveis funções específicas do compartimento para além da metilação da actina.
• A proteína está sujeita a splicing alternativo, fosforilação e conjugação de ubiquitina, e contém um domínio SET que se liga à S-adenosil-L-metionina, o doador de metil para a sua atividade de transferase.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio utilizado para este anticorpo é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 72–329 do SETD3 humano. Esta região cobre a porção N-terminal e parte do domínio SET; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça o SETD3 de comprimento total (peso molecular previsto ~67 kDa).
• Para o Western blotting (WB), é aconselhável executar lisados de controlo positivo e negativo apropriados (por exemplo, linhas celulares que expressam SETD3 vs. knockdown) para confirmar a especificidade. É esperada a deteção de uma banda em ~67 kDa em amostras humanas.
• Em ensaios de imunoprecipitação (IP), a concentração do anticorpo e o tempo de incubação podem necessitar de otimização; um ponto de partida padrão é 1–2 µg por 500 µg de lisado.
• Ao realizar ELISA, considere o uso de proteína SETD3 recombinante ou fragmentos peptídicos como antígenos de revestimento e titule o anticorpo para uma relação ótima sinal-ruído.
• Dado que a reatividade cruzada é indicada para humano, a validação noutras espécies deve ser realizada de forma independente, se necessário.

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