Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-SF3A3 para WB, ELISA - Q12874

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SF3A3

• SF3A3 (Fator de Splicing 3A Subunidade 3), também conhecida como SF3a60, SAP61, PRP9 ou PRPF9, é um componente de 59 kDa do subcomplexo SF3A dentro da ribonucleoproteína nuclear pequena U2 (snRNP) do spliceossomo (UniProt Q12874).

• Desempenha um papel central no splicing de pré-mRNA como parte do complexo 17S U2 SnRNP, que participa diretamente na montagem inicial do spliceossomo ao reconhecer o sítio de ramificação do íntron e promover a seleção da adenosina do sítio de ramificação, o nucleófilo para a primeira etapa de transesterificação. Referências relacionadas: PMID:10882114, PMID:11533230, PMID:32494006

• SF3A3 contribui para a formação do complexo E pré-spliceossomo e do complexo A do spliceossomo pré-catalítico, e permanece associada através da formação dos complexos B do spliceossomo pré-catalítico. Referências relacionadas: PMID:10882114, PMID:11533230, PMID:29360106, PMID:30315277

• Subcelularmente, a SF3A3 está localizada em speckles nucleares e no nucleoplasma, consistente com seu papel no armazenamento de fatores de splicing e em sítios de transcrição ativa.

• A proteína é expressa de forma ubíqua nos tecidos e está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, conforme identificado por estudos de proteômica.

• SF3A3 contém domínios dedo de zinco e coordena íons de zinco, indicando funções de ligação a metais que podem estabilizar a estrutura da proteína ou mediar interações dentro do spliceossomo.

• O complexo SF3A, composto por SF3A1, SF3A2 e SF3A3, é essencial para o recrutamento do U2 snRNP e a associação estável com o pré-mRNA; deficiências na SF3A3 perturbam a fidelidade do splicing e podem levar a transcritos aberrantes.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético mapeado para a região N-terminal (aa 1-100) do SF3A3 humano. Para Western blotting, é esperada uma banda específica próxima a 59 kDa; recomendamos o uso de extratos nucleares ou lisados de células inteiras de linhagens celulares humanas (por exemplo, HeLa, HEK293) ou de camundongo. É aconselhável uma pré-validação do anticorpo no sistema de amostra relevante.

• Para aplicações de ELISA, o peptídeo imunógeno pode ser usado como antígeno de revestimento; no entanto, a detecção do SF3A3 nativo em amostras complexas pode exigir otimização. Considere emparelhar com um anticorpo de detecção direcionado a um epítopo não sobreposto.

• A reatividade cruzada foi relatada para humano e camundongo; confirme a reatividade em outras espécies, se necessário, pois a homologia da sequência varia.

• Use controles negativos apropriados (por exemplo, knockdown por siRNA) para verificar a especificidade em seu contexto experimental.

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