Anticorpo monoclonal de coelho Anti-SFTPD (Proteína Surfactante D) para WB, ELISA - P35247

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SFTPD (SP-D)

• A proteína D associada ao surfactante pulmonar (SP-D), codificada pelo gene SFTPD (também conhecido como COLEC7, PSPD, SFTP4), é um membro da família das colectinas pertencente à superfamília das lectinas do tipo C.
• SP-D desempenha um papel crítico na defesa imunológica inata do pulmão ao se ligar a microrganismos inalados, antígenos orgânicos e toxinas através do seu domínio de reconhecimento de carboidratos, interagindo com lipopolissacarídeos bacterianos, oligossacarídeos e ácidos graxos.
• A proteína modula a função de leucócitos nas respostas imunológicas e pode participar da reorganização ou renovação do surfactante pulmonar, contribuindo para a manutenção da homeostase alveolar.
• SP-D é uma proteína secretada localizada no espaço extracelular e na matriz, especificamente abundante no filme superficial pulmonar onde faz interface com as barreiras ar-líquido.
• A expressão tecidual do SFTPD é detectada de forma proeminente no pulmão, com expressão adicional observada no cérebro, pâncreas e adipócitos maduros do tecido adiposo.
• A proteína contém características estruturais que incluem um domínio de enrolamento de cordão, região semelhante ao colágeno e pontes dissulfeto; sofre modificações pós-traducionais como hidroxilação, glicosilação e S-nitrosilação, e requer cálcio para sua atividade de lectina.
• SP-D se liga fortemente à maltose e outras porções alfa-glucosil, o que pode facilitar o reconhecimento de carboidratos da superfície microbiana.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético; para WB, certifique-se de que o anticorpo reconhece a proteína nativa de comprimento completo sob condições desnaturantes e redutoras, dado o peso molecular previsto de ~38 kDa (humano). Valide lisados de tecido pulmonar ou linhagens celulares relevantes.
• Para ELISA, considere usar a proteína SP-D recombinante ou peptídeo como antígeno de revestimento, e teste diferentes concentrações do anticorpo para obter sensibilidade ótima. Observe que a SP-D é secretada, portanto meios condicionados ou lavado broncoalveolar podem servir como fontes naturais de amostra.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato foi indicada; ao usar essas espécies, verifique os tamanhos das bandas em WB, já que os ortólogos de camundongo e rato têm pesos moleculares semelhantes, mas podem apresentar pequenas diferenças. Recomenda-se a realização de experimentos piloto com controles positivos compatíveis com a espécie.
• Como a SP-D contém domínios de lectina dependentes de cálcio, a presença de cálcio nos tampões pode afetar a ligação do anticorpo em certos formatos de ensaio; considere testar com e sem quelantes de cálcio se ocorrerem resultados inconsistentes.

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