Anticorpo Policlonal Anti-SH3PXD2A para WB, IF/ICC, ELISA - Q5TCZ1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SH3PXD2A

• A SH3PXD2A (proteína 2A contendo domínio SH3 e PX) é uma proteína adaptadora também conhecida como TKS5, FISH e SH3MD1. Pertence à família TKS e contém um domínio PX N-terminal e cinco domínios SH3 C-terminal, com splicing alternativo gerando múltiplos isoformas.
• A proteína é um andaime chave na formação de invadopódios e podossomos, facilitando a degradação da matriz extracelular (MEC) e promovendo a invasividade das células cancerígenas. Liga-se a metaloproteinases de matriz (ADAMs), NADPH oxidases (NOXs) e fosfoinositídeos. Referências relacionadas: PMID:27789576
• A SH3PXD2A organiza a geração de espécies reativas de oxigênio (ROS) dependente de NOX1 ou NOX3 e localiza ROS nos invadopódios, contribuindo para a sinalização celular e remodelação da matriz.
• Em associação com a ADAM12, a SH3PXD2A media o efeito neurotóxico do peptídeo beta-amiloide, ligando-a a processos neurodegenerativos.
• A proteína localiza-se no citoplasma e concentra-se nas projeções celulares, particularmente nos podossomos, e é detectada nas junções celulares.
• É predominantemente expressa em linhagens de células cancerígenas, com altos níveis encontrados em carcinomas de mama invasivos e melanomas.
• Uma extensa fosforilação regula a função da SH3PXD2A, e sua estrutura 3D foi caracterizada. A proteína apresenta regiões de alfa-hélices enroladas (coiled-coil) e repetições de domínio SH3.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 806–1105, cobrindo a região C-terminal rica em domínios SH3. Este projeto visa uma área funcionalmente crítica, mas você deve considerar a possível variabilidade de isoformas e validar o reconhecimento em seu sistema experimental específico.
• Para Western blotting, espere uma banda em torno de 125 kDa; no entanto, modificações pós-traducionais ou isoformas podem produzir bandas adicionais. Use controles positivos apropriados (por exemplo, linhagens de células cancerígenas invasivas) e confirme a especificidade com amostras de knockdown ou knockout.
• Na imunofluorescência/ICC, o anticorpo deve marcar podossomos e regiões citoplasmáticas. Empregue protocolos de fixação e permeabilização adequados e faça co-marcação com marcadores de podossomos (por exemplo, cortactina) para confirmar a localização.
• Para ELISA, combine este anticorpo com um anticorpo de captura se estiver projetando um ensaio sanduíche, e otimize as condições de revestimento usando fragmentos recombinantes de SH3PXD2A.
• Devido à reatividade cruzada com camundongo, você pode validar modelos usando tecidos ou linhagens celulares de camundongo, mas sempre compare os padrões de expressão com bancos de dados conhecidos.

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