Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-SHARPIN para WB, ELISA - Q9H0F6

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SHARPIN

• SHARPIN (proteína que interage com o domínio RH associada a SHANK, também conhecida como SIPL1) é um componente do complexo de montagem de cadeias de ubiquitina lineares (LUBAC), que catalisa a formação de cadeias de poliubiquitina ligadas a Met1 (lineares), essenciais para a sinalização NF-kappa-B e a regulação inflamatória.
  Referências relacionadas: PMID:21455173, PMID:21455180, PMID:21455181
• O complexo LUBAC conjuga poliubiquitina linear a moléculas-chave de sinalização, como IKBKG (NEMO) e RIPK1, ativando assim as vias canônicas NF-kappa-B e JNK e protegendo as células da apoptose induzida por TNF.
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• SHARPIN participa da defesa imunológica inata ao revestir bactérias citosólicas com cadeias de ubiquitina lineares, que atuam como um sinal de "coma-me" para a xenofagia e promovem a ativação de NF-kappa-B.
  Referências relacionadas: PMID:28481331
• Junto com a desubiquitinase OTULIN, o complexo LUBAC modula a sinalização canônica de Wnt durante a angiogênese.
  Referências relacionadas: PMID:23708998
• A proteína SHARPIN está localizada no citoplasma, citosol e sinapse, e contém um domínio dedo de zinco juntamente com múltiplos sítios de fosforilação.
• SHARPIN é altamente expressa no músculo esquelético e na placenta, com níveis mais baixos no cérebro, coração, cólon, timo, baço, rim, fígado, pulmão e leucócitos do sangue periférico; sua expressão é aumentada em vários tecidos tumorais, incluindo tumores renais, hepáticos, ovarianos e pancreáticos.
• O splicing alternativo de SHARPIN produz múltiplas isoformas, e a proteína está sujeita à fosforilação e à ligação de metais, em consonância com suas funções na conjugação de ubiquitina e na sinalização intracelular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à porção N-terminal (aa 1-126) da SHARPIN humana; considere que essa região pode ser conservada e, portanto, o anticorpo pode reconhecer múltiplas isoformas e apresentar reatividade cruzada com SHARPIN de camundongo e rato, conforme indicado.
• Para Western blotting, espera-se uma banda prevista em torno de 40 kDa; no entanto, produtos de clivagem ou formas modificadas pós-traducionalmente podem produzir bandas adicionais. Otimize os controles de carregamento e valide a especificidade no tecido ou na linhagem celular relevante.
• Adequado para ELISA; empregue condições apropriadas de bloqueio e detecção e confirme a linearidade utilizando padrões de proteína recombinante.

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