Anticorpo Policiclonal Anti-SHC4 para WB, IF/ICC, ELISA - Q6S5L8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SHC4

• A proteína transformadora SHC 4 (SHC4), também conhecida como RaLP ou hShcD, é um membro da família de proteínas adaptadoras SHC. Ela contém um domínio SH2 e um domínio de ligação a fosfotirosina, mediando interações com quinases de receptor ativadas e efetores downstream.
• A SHC4 ativa vias migratórias dependentes e independentes de Ras em melanomas, contribuindo para a invasão e metástase de células tumorais.
• Ela participa das fases iniciais da fosforilação de tirosina induzida pela agrina na CHRNB1 (subunidade β1 do receptor de acetilcolina) na membrana pós-sináptica, ligando sinais da matriz extracelular ao agrupamento de receptores sinápticos.
• A SHC4 se localiza na membrana celular pós-sináptica, o que é consistente com seu papel na sinalização sináptica e na migração de melanomas.
• A expressão tecidual é altamente restrita: a SHC4 é expressa apenas em melanomas, com expressão fraca em melanócitos normais e nevos benignos. Sua expressão aumenta acentuadamente na transição da fase de crescimento radial para vertical e em melanomas metastáticos, correlacionando-se com a aquisição de competência migratória e invasiva.
• A proteína sofre splicing alternativo e é regulada por fosforilação, que modula suas funções de adaptador.
• O peso molecular da SHC4 é de aproximadamente 69 kDa.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno, fragmento N-terminal recombinante (aa 1-185), pode detectar múltiplas isoformas de SHC4 resultantes de splicing alternativo. Considere usar uma escada de faixa completa para identificar as bandas principais.
• Para Western blot, uma banda proeminente próxima de 69 kDa é esperada em linhagens de células de melanoma; valide a especificidade do anticorpo usando amostras de controle positivo e negativo, devido à expressão restrita.
• Na imunofluorescência ou ICC, aguarde localização na membrana ou sinapse; a co-coloração com marcadores de membrana pode confirmar a especificidade.
• A reatividade cruzada relatada com camundongo sugere utilidade em modelos murinos, mas a homologia deve ser avaliada; teste no seu sistema de amostras para verificar a reatividade.
• Os ensaios de ELISA podem exigir titulação cuidadosa do antígeno de revestimento e da concentração do anticorpo; considere o formato de ELISA indireto para detecção.
• Para todas as aplicações, confirme a especificidade da banda e a relação sinal-ruído usando condições adequadas de bloqueio e lavagem; resultados não ótimos podem exigir etapas de titulação do anticorpo ou de recuperação do antígeno.

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