Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-SIK1 para WB, ELISA - P57059

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SIK1

• A SIK1 (também conhecida como MSK, SNF1LK ou quinase 1 induzível por sal) é uma serina/treonina-proteína quinase que fosforila alvos downstream, incluindo HDAC4, HDAC5, PPME1, SREBF1 e CRTC1/TORC1.
• Ela regula a gliconeogênese e a lipogênese hepáticas ao fosforilar e inibir os coativadores do CREB CRTC1/TORC1 e CRTC2/TORC2, bem como o SREBF1, suprimindo assim a transcrição mediada por CREB em resposta à sinalização do cAMP. Referências relacionadas: PMID:29211348
• A SIK1 está envolvida na diferenciação das células musculares e na cardiomiogênese ao fosforilar as histonas desacetilases de classe II HDAC4 e HDAC5, levando à ativação dos genes-alvo do MEF2 e à regulação da saída do ciclo celular.
• Ela participa da regulação dos ritmos circadianos ao atenuar a indução de PER1 em resposta à luz, por meio da fosforilação de CRTC1/TORC1.
• A localização subcelular inclui tanto o citoplasma quanto o núcleo, de acordo com seu papel no transporte entre compartimentos e na fosforilação de alvos nucleares e citoplasmáticos.
• A SIK1 contém um domínio de ligação ao ATP e requer magnésio como cofator para sua atividade quinase; é classificada como uma transferase e membro da família das serina/treonina-proteína quinases.
• A proteína está associada a palavras-chave como Ritmos biológicos, Ciclo celular, Supressor tumoral e Variante associada a doença (DEE30, epilepsia).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1-100 da SIK1 humana (NP_775490.2), tendo como alvo a região N-terminal; isso pode permitir a detecção da SIK1 de comprimento total e de suas isoformas.
• Para Western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 85 kDa; valide a especificidade utilizando controles positivos e negativos apropriados, como lisados celulares que superexpressam ou apresentam knockout de SIK1.
• A reatividade cruzada com a SIK1 de camundongo foi confirmada; considere realizar um alinhamento de sequências para avaliar a reatividade com outras espécies, se necessário.
• Para aplicações de ELISA, as concentrações ideais dos anticorpos de revestimento e detecção devem ser determinadas empiricamente utilizando o analito e a matriz da amostra relevantes.
• Considerando os papéis da SIK1 em múltiplas vias de sinalização, considere utilizar inibidores específicos de fosfatases durante a preparação das amostras para preservar os estados de fosforilação.

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