Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-SIRT1 (Validado por KO) para WB, IF/ICC, ELISA - Q96EB6

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SIRT1

• O SIRT1 é uma desacetilase de proteína dependente de NAD que atua como um sensor metabólico chave, ligando a regulação transcricional ao estado de energia intracelular e coordenando diversos processos celulares, como ciclo celular, resposta a danos no DNA, metabolismo, apoptose e autofagia.
  Referências relacionadas:
  PMID:11672523, PMID:12006491, PMID:14976264
• Modula a função da cromatina através da desacetilação das histonas H1, H2A e H3, e promove alterações na metilação de histonas, levando à repressão transcricional.
  Referências relacionadas:
  PMID:15469825
• O SIRT1 desacetila uma ampla gama de fatores de transcrição e co-reguladores, incluindo p53, FOXO1/3/4, NF-κB, PGC-1α e outros, regulando assim a expressão de genes alvo de forma positiva e negativa.
  Referências relacionadas:
  PMID:14976264, PMID:14980222, PMID:15152190, PMID:11672523, PMID:12006491, PMID:15692560, PMID:16892051
• Desempenha papéis críticos na resposta e reparo de danos no DNA ao desacetilar proteínas de reparo como XRCC6/Ku70, WRN, APEX1 e NBN, facilitando seu recrutamento ou atividade; também reprime a expressão de genes de reparo de DNA.
  Referências relacionadas:
  PMID:15205477, PMID:16998810, PMID:17334224, PMID:20097625, PMID:19934257
• O SIRT1 é um componente do complexo eNoSC e está envolvido no silenciamento de rDNA, formação de heterocromatina e regulação do comprimento do telômero, contribuindo para a estabilidade genômica.
  Referências relacionadas:
  PMID:18485871, PMID:21504832, PMID:15469825, PMID:18004385
• A localização subcelular inclui o núcleo, corpos PML, citoplasma e mitocôndrias, com transporte nucleo-citoplasmático observado em resposta a vários sinais. Implicado na regulação do ritmo circadiano ao desacetilar proteínas centrais do relógio e histonas nos promotores de genes do relógio.
  Referências relacionadas:
  PMID:18662546
• O splicing alternativo produz múltiplas isoformas, incluindo uma isoforma cataliticamente inativa (75SirT1) que pode regular a apoptose, e as duas principais isoformas cooperam para regular a atividade do p53.
• Além da desacetilação, o SIRT1 atua como uma desacilase de proteína-lisina mediando a delactilação, despropionilação e decrotonilação de proteínas alvo, como TEAD1, YAP1 e histonas.
  Referências relacionadas:
  PMID:28497810, PMID:38512451

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético; considere o uso de ensaios de competição com peptídeo para confirmar a especificidade em seu sistema experimental.
• Para WB, o peso molecular previsto é de ~82 kDa; otimize o bloqueio e a diluição do anticorpo para seus lisados celulares (sugere-se começar com diluição de 1:1000 por protocolos padrão).
• Para IF/ICC, as condições de fixação e permeabilização podem afetar a acessibilidade do epítopo; teste tanto a fixação com paraformaldeído quanto com metanol.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado para captura ou detecção, mas recomenda-se a validação do par com um par de anticorpos correspondente adequado.

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