Anticorpo policlonal anti-SIRT2 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8IXJ6

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de SIRT2

• SIRT2 (sirtuína-2, uma desacetilase proteica dependente de NAD) é membro da família das sirtuínas, também conhecida como proteína 2 semelhante a SIR2, codificada pelo gene SIRT2. Atua como uma desacetilase dependente de NAD, removendo grupos acetil de lisinas internas em histonas (por exemplo, H4K16, H3K56) e em proteínas não histônicas, como alfa-tubulina, fatores de transcrição e reguladores do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:12620231, PMID:16648462, PMID:18249187
• SIRT2 desempenha um papel fundamental no controle do ciclo celular e na estabilidade genômica, atuando no ponto de verificação da antefase para evitar a entrada mitótica prematura sob estresse dos microtúbulos e regulando a atividade do APC/C por meio da desacetilação de CDC20 e FZR1. Referências relacionadas: PMID:12697818, PMID:16909107, PMID:17488717, PMID:22014574
• Na cromatina, SIRT2 associa-se a sítios de início da transcrição e intensificadores, e modula a metilação da histona H4 por meio da desacetilação de H4K16ac, permitindo a deposição de H4K20me1 e a subsequente compactação da cromatina durante a mitose. Referências relacionadas: PMID:23468428
• SIRT2 desacetila a alfa-tubulina em Lys-40, influenciando a dinâmica dos microtúbulos, a motilidade neuronal, a arborização dos oligodendrócitos e a adesão celular; sua atividade é regulada pela fosforilação em Ser-368 mediada por ciclina E-CDK2. Referências relacionadas: PMID:18332217, PMID:18995842, PMID:17488717
• Além da desacetilação, SIRT2 também apresenta atividade de desacilase de lisina proteica, removendo grupos benzoíla, metacril e acila de ácidos graxos de cadeia longa (desmiristoilação e despalmitoilação) de proteínas-alvo, como KRAS e ARF6, regulando assim sua associação à membrana. Referências relacionadas: PMID:30154464, PMID:34961760, PMID:25704306, PMID:29239724, PMID:32103017
• Subcelularmente, SIRT2 localiza-se no núcleo, citoplasma, centrossomo, fuso mitótico, corpo intermediário e cones de crescimento, em consonância com suas funções na divisão celular, organização do citoesqueleto e desenvolvimento neuronal.
• Expressão tecidual: A isoforma 1 é expressa principalmente no coração, fígado e músculo esquelético; a isoforma 2 é fortemente expressa no córtex. SIRT2 é amplamente expressa, mas frequentemente encontra-se regulada negativamente em diversos tipos de câncer, sustentando uma função supressora tumoral.
• Palavras-chave adicionais: SIRT2 está envolvida na autofagia, regulação metabólica, resposta ao estresse oxidativo e imunidade inata. Referências relacionadas: PMID:20543840, PMID:21726808, PMID:24769394, PMID:23908241

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 300-350 de SIRT2 humano; verifique a homologia da sequência para a espécie de interesse, pois a reatividade cruzada foi relatada para humano, camundongo e rato.
• As aplicações recomendadas incluem WB, IHC-P, IF/ICC e ELISA. Para WB, o peso molecular previsto da proteína é de 43 kDa; utilize controles positivos apropriados (por exemplo, lisados de HeLa ou HEK293) para confirmar a especificidade da banda.
• Para IHC e IF, otimize as condições de recuperação antigênica e permeabilização, considerando a localização dinâmica de SIRT2 no núcleo, citoplasma e citoesqueleto.
• Como se trata de um anticorpo policlonal, ele pode reconhecer várias isoformas ou modificações pós-traducionais; observe que a isoforma 2 é predominantemente expressa em tecidos neurais.
• Para estudos funcionais, a atividade de SIRT2 é dependente de NAD; considere incluir NAD+ ou inibidores (por exemplo, AGK2) ao avaliar a função enzimática.

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