Anticorpo Policlonais Anti-SLC12A2 para WB, IHC-P, ELISA - P55011

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SLC12A2

• SLC12A2 (também conhecida como NKCC1, BSC2, CCC1, BSC-2, KILQS, PPP1R141) é um cotransportador de cátions-cloreto que medeia o transporte eletroneutro de íons sódio, potássio e cloreto através da membrana plasmática, desempenhando um papel crítico na regulação do volume celular e na homeostase iônica. Referências relacionadas: PMID:16669787 PMID:32081947 PMID:32294086
• É membro da família de transportadores de solutos 12 (SLC12) de cotransportadores de cloreto acoplados a cátions eletroneutros, caracterizada por 12 domínios transmembranares e terminais N e C intracelulares.
• A SLC12A2 está localizada na membrana basolateral das células epiteliais e é amplamente expressa em diversos tecidos, o que é consistente com seu papel constitutivo na manutenção do volume celular.
• A proteína sofre diversas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, que regulam sua atividade de transporte e o tráfego membranar.
• Clinicamente, mutações na SLC12A2 estão associadas à surdez não sindrômica autossômica recessiva e à deficiência intelectual.
• A SLC12A2 é um alvo conhecido do bumetanida diurético de alça, utilizado em pesquisa e clinicamente para inibir a atividade do NKCC1.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 120-280) corresponde a um domínio intracelular conservado entre humano, camundongo e rato, o que suporta a reatividade cruzada e o direcionamento ao NKCC1 total.
• Para detecção por Western blot da proteína de 131 kDa, utilize um gel SDS-PAGE de 6 a 8% e garanta uma transferência eficiente por blotting em tanque úmido com condições otimizadas.
• Na imuno-histoquímica, confirme a especificidade do anticorpo utilizando controles positivos conhecidos (por exemplo, rim, cólon) e negativos (por exemplo, tecido com knockout de NKCC1), e considere métodos de recuperação de antígeno.
• Ao utilizar o ELISA, realize a titulação pareada para determinar as concentrações ótimas de revestimento e detecção; note que a natureza policlonal pode influenciar na reprodutibilidade.

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