Anticorpo Monoclonal Anti-SLC25A4/ANT1 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P12235

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SLC25A4/ANT1

• Identidade da proteína e isoformas: O SLC25A4 codifica a isoforma do músculo cardíaco/esquelético da translocase ADP/ATP (ANT1), um membro da família de transportadores mitocondriais. Nomes alternativos incluem translocase de nucleotídeos de adenina 1, proteína carreadora ADP/ATP 1 e carreador de solutos da família 25 membro 4.
• Função principal de antiportador: Catalisa a troca de ATP mitocondrial por ADP citosólico, uma etapa crítica no suprimento de energia celular. O carreador opera através de um mecanismo de acesso alternado, alternando entre estados abertos para o citoplasma e para a matriz para transportar um substrato por vez. Referências relacionadas: PMID:21586654 PMID:27693233 PMID:23173940
• Envolvimento com o poro de transição de permeabilidade mitocondrial (mPTP): Participa do poro de transição de permeabilidade mitocondrial, um canal não específico que permeabiliza a membrana mitocondrial interna e desencadeia a morte celular. Referências relacionadas: PMID:31883789
• Transportador de prótons e termogênese: Além da troca de nucleotídeos, o ANT1 pode funcionar como um transportador de prótons, desacoplando assim a respiração da síntese de ATP para gerar calor. Esta atividade de condução de prótons é regulada por ácidos graxos livres e inibida pela troca de ADP/ATP, posicionando o ANT1 como um regulador mestre do equilíbrio de saída de energia.
• Regulação da mitofagia: Independentemente de sua atividade de transporte, o ANT1 promove a mitofagia interagindo com o TIMM44, o que inibe a translocase de pré-sequência mitocondrial TIM23 e estabiliza o PINK1 em mitocôndrias danificadas.
• Localização subcelular: Reside exclusivamente na membrana mitocondrial interna, uma proteína transmembrana de múltiplas passagens.
• Modificações pós-traducionais e palavras-chave: A proteína está sujeita a acetilação, fosforilação, metilação e S-nitrosilação. As anotações da UniProtKB destacam seus papéis em cardiomiopatia, oftalmoplegia externa progressiva e como um fator hospedeiro em interações virais.
• Especificidade tecidual: Expresso em eritrócitos, bem como no músculo cardíaco e esquelético (conforme indicado pelo nome de sua isoforma).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que visa a região central (aa 100–200) do SLC25A4 humano. O epítopo reside em uma região conservada; a reatividade cruzada com camundongo e rato é suportada pelo alinhamento de sequência. Valide a reatividade com sua espécie de modelo específica se for crítico.
• Para Western blotting, espera-se uma banda principal em ~33 kDa. Lisados de controle validados por KO (por exemplo, HeLa ou A549) podem confirmar a especificidade e evitar sinais fora do alvo.
• Em imuno-histoquímica (IHC‑P) e imunofluorescência (IF/ICC), o padrão de coloração deve ser citoplasmático com distribuição mitocondrial. A recuperação de antígeno com tampão citrato (pH 6,0) pode melhorar a detecção. Inclua controles de isotipo apropriados.
• O anticorpo é adequado para imunoprecipitação (IP) e ELISA, tornando-o versátil para estudos de interação e ensaios quantitativos. Ao usar IP, considere o reticulação do anticorpo às contas para evitar a coeluição da cadeia pesada em ~55 kDa.
• Para ensaios funcionais que perturbam a integridade mitocondrial, note que o ANT1 pode influenciar a abertura do mPTP; assim, a coloração pode ser afetada pelo estado de estresse celular.

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