Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-SLCO2B1 para WB/ELISA - O94956

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SLCO2B1

• O SLCO2B1 (OATP2B1/OATP-B) é um transportador de ânions orgânicos multiespecífico que medeia a captação independente de Na+ de vários substratos, incluindo conjugados de sulfato de esteroides (estrona-3-sulfato, DHEA-S, sulfato de pregnenolona), prostaglandinas (PGD2, PGE1, PGE2), tiroxina, leucotrieno C4 e tromboxano B2.
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• Desempenha papéis críticos na depuração hepática de ânions orgânicos, na transferência placentária de esteroides sulfatados derivados do feto, na absorção intestinal de xenobióticos e no transporte de neuroesteroides através da barreira hematoencefálica.
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• Atua como um transportador de heme, promovendo a disponibilidade de ferro celular através da heme-oxigenase, e medeia a captação de coproporfirina III, sugerindo um papel na homeostase do heme/porfirina.
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• O mecanismo de transporte envolve a troca de ânions, provavelmente usando bicarbonato ou glutamato como contra-ânions, e é estimulado por pH ácido; um gradiente de prótons direcionado para o interior pode impulsionar a captação de estrona-3-sulfato.
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• Subcelularmente, a proteína se localiza na membrana celular, com polarização específica do tecido: membrana basal em hepatócitos e células de Sertoli, basolateral em sinciciotrofoblasto e apical em enterócitos.
• Altamente expresso nas membranas sinusoidais do fígado, rim, trofoblastos placentários, intestino delgado, células endoteliais da barreira hematoencefálica, retina, músculo esquelético e testículo; também detectado em níveis mais baixos no pâncreas, pulmão, coração, cólon, ovário e baço.
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• As modificações pós-traducionais incluem a formação de ligações dissulfeto, N-glicosilação e fosforilação; é uma glicoproteína fosforilada com múltiplas hélices transmembrana.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas com distribuições teciduais distintas: a isoforma 2 predomina no cérebro, enquanto a isoforma 1 predomina no fígado.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 130-210) corresponde a uma região de alça intracelular prevista, adequada para detectar o SLCO2B1 total em condições desnaturantes (WB) e nativas (ELISA); espera-se uma banda em ~77 kDa, com possíveis bandas de peso molecular mais alto devido à glicosilação.
• Para WB, considere o uso de protocolos de extração de proteínas de membrana e o carregamento de controles positivos apropriados, como lisados de fígado, placenta ou intestino humanos; verifique a especificidade em amostras com knockdown de siRNA, se disponível.
• Em aplicações de ELISA, o revestimento com a proteína recombinante SLCO2B1 ou o peptídeo imunógeno pode ajudar a avaliar o título do anticorpo; note que o anticorpo pode reconhecer o SLCO2B1 de camundongo, conforme indicado pela reatividade cruzada, mas valide no seu tecido específico de camundongo.
• Otimize o bloqueio e a diluição do anticorpo para minimizar o fundo, especialmente em tecidos com alta atividade de peroxidase endógena (por exemplo, fígado).
• Ao estudar a função de transporte, lembre-se de que a atividade do SLCO2B1 é sensível ao pH; ensaios funcionais in vitro podem exigir um tampão ácido (pH 5–6) para mimetizar o microambiente.

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