Anticorpo Policlonial de Coelho Anti-Smad1/Smad5/Smad9 para WB, IF/ICC, ELISA - Q15797/Q99717/O15198

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de Smad1/Smad5/Smad9

• Modulador transcricional envolvido em diversos processos celulares, incluindo desenvolvimento embrionário, diferenciação celular e homeostase tecidual. Referências relacionadas: PMID:9335504
• Após a ligação do ligante BMP, é fosforilado pelos receptores BMP do tipo I, se associa ao SMAD4 e se transloca para o núcleo para atuar como fator de transcrição que reconhece os Elementos de Ligação a Smad (SBEs). Referências relacionadas: PMID:33667543
• Pertence à família SMAD: Smad1, Smad5 e Smad9 são membros altamente homólogos que medeiam predominantemente as vias de sinalização da proteína morfogenética óssea (BMP).
• Localização subcelular: realiza transporte entre o citoplasma e o núcleo em resposta à ativação do receptor BMP.
• É regulado pós-traducionalmente por fosforilação, acetilação e conjugação com ubiquitina; contém um motivo de ligação a zinco para interação com o DNA.
• Especificidade tecidual: é expresso de forma ubíqua, com níveis mais altos no coração e no músculo esquelético.
• Também medeia a degradação do repressor SNIP1 de CREBBP/EP300 e regula positivamente a expressão de MSX1 induzida por BMP4 (Por similaridade).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot, considere enriquecer as frações nucleares para aumentar a detecção de Smad1/5/9 fosforilado, pois esses fatores de transcrição se acumulam no núcleo após a estimulação por BMP.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica, padrões de coloração citoplasmática e nuclear podem ser observados dependendo do estado de ativação; valide as condições de fixação e permeabilização para uma detecção ideal.
• Para ELISA, a natureza policlonal desse anticorpo pode fornecer alta sensibilidade para detectar níveis totais da proteína Smad1/5/9; no entanto, a reatividade cruzada com outros membros da família Smad deve ser testada no sistema de ensaio específico.
• O imunógeno corresponde a uma região conservada do domínio MH1 N-terminal (aa 19-125), o que sugere que esse anticorpo provavelmente reconhece o domínio de ligação ao DNA; considere usar peptídeos de bloqueio adequados ou controles de knockout para confirmar a especificidade.

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