Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Smad2 (Validado por KO) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15796

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Smad2

• O membro 2 da família SMAD (Smad2), também conhecido como JV18-1, hMAD-2 e homólogo MAD 2, é um transdutor de sinal intracelular e modulador transcricional de ~52 kDa.
• Funciona como um SMAD regulado por receptor (R-SMAD) ativado por quinases de receptor tipo 1 de TGF-beta e activina, mediando a transdução de sinal da superfície celular para o núcleo.
• Após fosforilação, o Smad2 forma um complexo com o SMAD4 e transloca para o núcleo, onde se liga ao elemento TRE nos promotores de genes responsivos ao TGF-beta para regular a transcrição.
• O Smad2 regula positivamente a atividade da quinase PDPK1, promovendo sua dissociação da proteína inibitória 14-3-3 YWHAQ.
• Pode atuar como um supressor de tumor no carcinoma colorretal, conforme indicado por estudos que mostram sua inativação nesses cânceres. Referências relacionadas: PMID:8752209
• A localização subcelular é principalmente citoplasmática, mas ele se desloca para o núcleo após ativação; também é detectado no núcleo em condições basais.
• Alta expressão é observada em músculo esquelético, células endoteliais, coração e placenta, com funções específicas de tecido no desenvolvimento e diferenciação.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação (chave para ativação), acetilação e ubiquitinação, que regulam sua estabilidade, atividade e interações proteicas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aminoácidos 1-100) do Smad2 humano, que é conservada entre humano, camundongo e rato, suportando a reatividade cruzada listada.
• Para Western blotting (WB), a banda esperada é de aproximadamente 52 kDa; a validação por knockout garante especificidade, mas ainda é aconselhável incluir controles positivos e negativos em seus experimentos.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), considere otimizar a recuperação antigênica e a diluição do anticorpo para cada tipo de tecido, pois os níveis de expressão de Smad2 variam.
• Para ELISA, a natureza policlonal pode aumentar a sensibilidade, mas faça titulação do anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal para o seu formato de ensaio específico.
• Como o Smad2 é uma proteína de sinalização que pode ser modificada pós-traducionalmente, garanta que as condições de lise e preparação da amostra preservem as modificações relevantes se estiver estudando estados de ativação.

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