Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-SMAD2/SMAD3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15796/P84022

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SMAD2/SMAD3

• O SMAD2 é uma proteína SMAD regulada por receptor (R-SMAD), também conhecida como MADH2, MADR2 e JV18-1, e compartilha alta homologia com o SMAD3.
• Funciona como um transdutor de sinal intracelular para as quinases do receptor tipo 1 do TGF-beta e activina, mediando respostas transcricionais.
• Após fosforilação, o SMAD2 forma um complexo com o SMAD4, transloca-se para o núcleo e se liga ao elemento TRE para regular a transcrição de genes alvo.
• O SMAD2 regula positivamente a atividade da quinase PDPK1 estimulando sua dissociação da proteína 14-3-3 YWHAQ.
• Pode atuar como um supressor de tumor em carcinoma colorretal. Referências relacionadas: PMID:8752209
• A localização subcelular é citoplasmática e nuclear, deslocando-se em resposta à ativação de sinalização.
• Altamente expresso no músculo esquelético, células endoteliais, coração e placenta.
• Sujeito a modificações pós-traducionais incluindo acetilação, fosforilação e conjugação de ubiquitina, que regulam a atividade e estabilidade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético dos aminoácidos 150-270 do SMAD2/SMAD3 humano (NP_005893.1); considere o alinhamento de sequência para avaliar a reatividade cruzada com outras espécies ou isoformas.
• Para Western blot, espere bandas em torno de 52 kDa (SMAD2) e 48 kDa (SMAD3); bandas adicionais podem representar formas de splicing alternativas ou proteínas modificadas pós-traducionalmente.
• Valide a especificidade do anticorpo usando knockdown por siRNA, linhagens celulares knockout ou tratamento com fosfatase para confirmar sinais dependentes de fosforilação.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), é recomendada a recuperação de antígeno ideal e titulação do anticorpo para as melhores relações sinal-ruído.
• O ELISA pode ser usado para detecção quantitativa; certifique-se de que os tampões de revestimento e as condições de incubação apropriados sejam otimizados a partir do sistema de amostra relevante.

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