Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Smad3 (Validado em KO) para WB, IHC-P, ELISA - P84022

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Smad3

• O membro 3 da família SMAD (Smad3) é um transdutor de sinal intracelular e modulador transcricional ativado por TGF-beta (fator de transformação do crescimento) e cinases do receptor tipo 1 da ativina.
• Liga-se ao elemento TRE na região promotora de muitos genes regulados pelo TGF-beta e, ao formar o complexo SMAD3/SMAD4, ativa a transcrição. Também pode montar um complexo SMAD3/SMAD4/JUN/FOS no local AP-1/SMAD para regular a transcrição mediada por TGF-beta.
• O Smad3 regula negativamente a cicatrização de feridas, provavelmente modulando tanto o crescimento quanto a migração de queratinócitos primários e alterando a quimiotaxia mediada por TGF-beta de monócitos. Este efeito parece ser sensível a hormônios.
• Atua como regulador da condrogénese e osteogénese e inibe a cicatrização precoce de fraturas ósseas.
• O Smad3 regula positivamente a atividade da cinase PDPK1 ao estimular a sua dissociação da proteína 14-3-3 YWHAQ, que atua como um regulador negativo.
• A proteína localiza-se tanto no citoplasma como no núcleo.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, ADP-ribosilação, fosforilação e ubiquitinação. Contém domínios de ligação a metais e de ligação a DNA e participa em interações hospedeiro-vírus.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio utilizado é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 100–200 do Smad3 humano (NP_005893.1). Ao aplicar em espécies não humanas, confirme a homologia da sequência para garantir a reatividade.
• Para Western blot (WB), use controlos de carregamento apropriados e verifique a banda em aproximadamente 48 kDa; a validação por knockout é recomendada para confirmar a especificidade nas suas amostras.
• Para IHC-P, otimize as condições de recuperação de antigénio e inclua controlos de tecido positivos e negativos para validar os padrões de coloração.
• Para aplicações ELISA, considere o emparelhamento com um anticorpo de captura ou deteção adequado para formatos sanduíche e confirme o desempenho usando a proteína Smad3 recombinante.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato foi validada; no entanto, aconselha-se a verificação independente no seu sistema experimental específico.

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