Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-Smad3 para WB, IF/ICC, ELISA - P84022

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Smad3

• O membro 3 da família SMAD (Smad3), também conhecido como homólogo MAD 3 ou hMAD-3, é um transdutor de sinal intracelular e modulador transcricional codificado pelo gene SMAD3 (MADH3).
• Como um SMAD regulado por receptor (R-SMAD), a Smad3 medeia a sinalização de TGF-beta e activina ao se ligar às quinases do receptor tipo 1.
• Após a fosforilação, a Smad3 forma um complexo com a SMAD4, transloca para o núcleo e se liga ao elemento TRE nas regiões promotoras para regular a transcrição de genes alvo.
• Ela também pode interagir com os fatores de transcrição AP-1 JUN/FOS para formar um complexo nos sítios AP-1/SMAD, modulando assim a transcrição.
• A Smad3 trafega entre o citoplasma e o núcleo, com sua localização subcelular dinamicamente influenciada pela atividade de sinalização.
• A proteína sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação, ADP-ribosilação e ubiquitinação, além de conter um domínio de ligação a zinco.
• A splicing alternativa gera múltiplas isoformas, e a Smad3 está implicada em processos como cicatrização de feridas, condrogênese, osteogênese e aneurisma aórtico.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 150–250 da Smad3 humana, uma região que deve estar exposta e conservada entre humano, camundongo e rato, o que suporta a reatividade cruzada.
• Para Western blot, espere uma banda em torno de 48 kDa; valide a detecção nos lisados de células relevantes e considere controles apropriados para confirmar a especificidade.
• Em imunofluorescência/ICC, otimize as condições de fixação e permeabilização, e use contracoloração nuclear para monitorar a translocação da Smad3 após estimulação com TGF-beta.
• Para ELISA, pareie com um anticorpo de detecção compatível e teste diluições em série de Smad3 recombinante ou amostras nativas para estabelecer o intervalo linear e a sensibilidade.

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