Anticorpo monoclonal de coelho anti-Smad5 (validado por KO) para WB, ELISA - Q99717

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do Smad5

• SMAD5 é o produto do gene SMAD5 (MADH5) e também é conhecido como JV5-1, DWFC e homólogo 5 de Mothers against decapentaplegic.
• SMAD5 funciona como regulador transcricional na via de sinalização de BMP, desempenhando papéis fundamentais no desenvolvimento embrionário, na diferenciação celular, na angiogénese e na homeostase dos tecidos (PubMed:12064918, PubMed:16516194). Referências relacionadas: PMID:12064918, PMID:16516194
• Após a ativação do recetor de BMP, SMAD5 é fosforilado, associa-se a SMAD4 e transloca-se para o núcleo, onde o complexo reconhece os elementos de ligação a Smad (SBEs) para regular a expressão génica (PubMed:9442019, PubMed:33510867). Referências relacionadas: PMID:9442019, PMID:33510867
• SMAD5 não fosforilado encontra-se no citoplasma e nas mitocôndrias, onde regula o metabolismo energético ao promover a respiração mitocondrial e a glicólise através da interação com a hexocinase 1 (HK1) (PubMed:28675158). Referência relacionada: PMID:28675158
• SMAD5 é membro da família de SMADs regulados por recetores (R-SMAD), que medeia sinais da superfamília TGF-β.
• É expresso de forma ubíqua nos tecidos e sofre modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, que modulam a sua atividade.
• A localização subcelular é dinâmica: predominantemente citoplasmática no estado basal, nuclear após a ativação e também detetada nas mitocôndrias.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Na realização de Western blot, é esperado observar uma banda específica próxima de 52 kDa correspondente a SMAD5; valide-a no lisado celular ou tecidual apropriado (de origem humana, de camundongo ou de rato).
• Este anticorpo é adequado para aplicações de ELISA; as diluições de trabalho ideais devem ser determinadas empiricamente para cada formato de ensaio.
• O imunogénio (aa 186-260) tem como alvo uma região conservada; embora seja possível a reatividade cruzada com SMADs estreitamente relacionados, este anticorpo foi validado para o reconhecimento de SMAD5 humano, de camundongo e de rato.

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