Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Smad5 para WB, IHC-P, ELISA - Q99717

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Smad5

• SMAD5 é um membro da família SMAD, também conhecido como JV5-1, Homólogo 5 de Mothers against decapentaplegic (Homólogo 5 de MAD), codificado pelo gene SMAD5 (MADH5).
• Após estímulo do ligante BMP, o SMAD5 é fosforilado pelos receptores BMP do tipo I ativados (BMPRIs) e forma um complexo com o SMAD4. Este complexo transloca para o núcleo e regula a transcrição gênica ligando-se a Elementos de Ligação de Smad (SBEs) (PubMed:9442019, PubMed:33510867). Referências relacionadas: PMID:9442019 PMID:33510867
• SMAD5 desempenha um papel em vários processos biológicos, incluindo desenvolvimento embrionário, diferenciação celular, angiogênese e homeostase tecidual (PubMed:12064918, PubMed:16516194). Referências relacionadas: PMID:12064918 PMID:16516194
• Em seu estado não fosforilado, o SMAD5 localiza-se no citoplasma e nas mitocôndrias, onde promove a respiração mitocondrial e a glicólise interagindo com a hexoquinase 1 (HK1) em resposta a mudanças no pH citoplasmático (PubMed:28675158). Referências relacionadas: PMID:28675158
• A localização subcelular inclui o citoplasma, núcleo e mitocôndria, refletindo seu papel duplo na transdução de sinal e no metabolismo energético.
• Expresso de forma ubíqua em vários tecidos.
• Modificado pós-traducionalmente por fosforilação e acetilação, e contém domínios de ligação a zinco e de ligação ao DNA essenciais para sua função como regulador transcricional.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, espere uma banda em torno de 52 kDa; use controles de carga apropriados e valide com lisados celulares positivos e negativos conhecidos.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), a recuperação de antígeno pode ser necessária devido à localização nuclear/citoplasmática; teste em seções de tecido com expressão confirmada de SMAD5.
• O imunógeno abrange a região C-terminal (aminoácidos 186-465), incluindo o domínio MH2, portanto o anticorpo pode reconhecer tanto as formas fosforiladas quanto as não fosforiladas; confirme os estados de ativação usando anticorpos fosfo-específicos ou tratamentos.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato indica epítopos conservados; ao aplicar a outras espécies, verifique a homologia de sequência e realize validação.
• Para ELISA, otimize as condições de revestimento e use SMAD5 recombinante ou lisados celulares como controles positivos.

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