Anticorpo Monoclonal Anti-SMARCAD1 para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q9H4L7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SMARCAD1

• O SMARCAD1 (regulador de cromatina relacionado a SWI/SNF associado à matriz dependente de actina, subfamília A contendo a caixa DEAD/H 1) possui atividade intrínseca de remodelação de nucleossomos dependente de ATP e é necessário tanto para o reparo de DNA quanto para a organização da heterocromatina. Referências relacionadas: PMID:22960744 PMID:21820097
• Ele combina troca de histonas dependente de ATP com deposição de histonas independente de ATP semelhante a chaperona e montagem de nucleossomos. Referências relacionadas: PMID:21820097
• Promove a resecção da extremidade do DNA em quebras de fita dupla (DSBs) ao enfraquecer as interações histona-DNA nos nucleossomos flanqueadores. Referências relacionadas: PMID:22960744
• Necessário para a restauração da organização da heterocromatina após a replicação; facilita a manutenção direcionando a desacetilação de H3 e H4, a trimetilação de H3K9 (H3K9me3) e a restauração do silenciamento. Referências relacionadas: PMID:21549307
• Localiza-se predominantemente no núcleo e nos cromossomos.
• A isoforma 1 é amplamente expressa; a isoforma 3 é encontrada principalmente na pele e no esôfago. Ambas as isoformas são detectadas em fibroblastos e queratinócitos ao nível proteico. Referências relacionadas: PMID:29409814
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e ubiquitinação; a proteína canônica tem um peso molecular de aproximadamente 117 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Com base na sequência do imunógeno (aminoácidos 928–1026), este anticorpo reconhece a região C-terminal do SMARCAD1. Para Western blot (WB), prepare lisados usando tampão RIPA padrão e investigue bandas próximas a 117 kDa e uma isoforma menor em ~68 kDa; inclua controles positivos, como extratos de fibroblastos ou queratinócitos.
• Para imunoprecipitação (IP), use 1–2 µg de anticorpo por 500 µg de lisado celular e valide a co-precipitação com parceiros de interação conhecidos ou controles de IgG negativos.
• Em imunofluorescência (IF/ICC) e imuno-histoquímica (IHC-P), fixe células ou seções de tecido com paraformaldeído a 4% e permeabilize com Triton X-100 a 0,1%; são esperados padrões de coloração nuclear. Otimize a recuperação antigênica para seções de parafina.
• Para aplicações de ELISA, recubra as placas com fragmento recombinante de SMARCAD1 ou lisados de células/tecidos e realize uma titulação em grade para determinar as concentrações ideais de anticorpo e antígeno.
• Dada a reatividade cruzada com humano, camundongo e rato, o anticorpo é adequado para estudos multiespécies; no entanto, verifique o desempenho em seu sistema experimental específico.

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