Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-SMG1 para WB e ELISA - Q96Q15

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SMG1

• O SMG1 é uma quinase serina/treonina-proteína que desempenha um papel central no decaimento do mRNA mediado por nonsense (NMD) ao fosforilar a UPF1/RENT1. Faz parte do complexo SMG1C juntamente com SMG8 e SMG9.
• É recrutado para ribossomos paralisados para formar o complexo SURF (SMG1-UPF1-eRF1-eRF3), que se associa ao complexo de junção de éxons (EJC) via UPF2 para desencadear o NMD.
• Além do NMD, o SMG1 também atua na resposta ao estresse genotóxico, fosforilando p53/TP53 e contribuindo para a ativação ótima da p53 após danos no DNA. Sua depleção leva a danos espontâneos no DNA e maior sensibilidade à radiação ionizante.
• O SMG1 localiza-se tanto no núcleo quanto no citoplasma.
• É amplamente expresso, com níveis mais altos no coração e músculo esquelético, e também presente na placenta, cérebro, pulmão e baço, mas ausente no fígado.
• A proteína contém um domínio de ligação ao ATP e requer manganês como um cofator metálico. Passa por acetilação e fosforilação.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas do SMG1.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma sequência dentro da região C-terminal (aa 3562–3661) do SMG1 humano, distinta do domínio da quinase, potencialmente permitindo a detecção de isoformas completas e truncadas em Western blot.
• Para Western blot, devido ao grande tamanho da proteína (~411 kDa), use um gel de SDS-PAGE de baixa porcentagem (por exemplo, 6% ou gradiente) e tempos de transferência prolongados para garantir uma transferência eficiente da proteína de alto peso molecular.
• Valide o desempenho do anticorpo em amostras de camundongo se a reatividade cruzada for necessária, pois o anticorpo é relatado como reativo de forma cruzada com o SMG1 de camundongo.
• Para ELISA, considere usar o mesmo peptídeo como antígeno de controle positivo para estabelecer as condições do ensaio.
• Em estudos de NMD ou danos no DNA, use controles apropriados (por exemplo, status de fosforilação da UPF1) para confirmar a atividade do SMG1 em seu sistema experimental.

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