Anticorpo Policlonal Anti-SMPD1 / ASM para WB, IF/ICC, ELISA - P17405

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do SMPD1 / ASM

• SMPD1/ASM é uma hidrolase lisossomal que converte esfingomielina em ceramida, um mediador lipídico envolvido em apoptose, diferenciação e sinalização celular. Referências relacionadas: PMID:12563314, PMID:1840600, PMID:18815062
• Existe em duas formas enzimáticas: uma direcionada ao compartimento endolisossomal e a outra liberada extracelularmente, sendo a exocitose lisossomal uma fonte importante da forma secretada. Referências relacionadas: PMID:20807762, PMID:21098024, PMID:9660788, PMID:12563314, PMID:20530211
• Nos lisossomos, converte esfingomielina em ceramida e desempenha um papel na exportação de colesterol das membranas intraendolisossomais; também possui atividade de fosfolipase C. Referências relacionadas: PMID:20807762, PMID:21098024, PMID:25339683
• A ASM secretada reorganiza os "rafts" da membrana plasmática gerando ceramida, o que é crucial para a defesa do hospedeiro contra patógenos como Pseudomonas aeruginosa. Referências relacionadas: PMID:12563314, PMID:17303575, PMID:20807762, PMID:9393854
• A clivagem pela CASP7 no espaço extracelular produz uma forma mais ativa que aumenta a produção de ceramida e o reparo da membrana plasmática durante infecções bacterianas. Referências relacionadas: PMID:21157428
• A ativação da ASM é sequestrada por vírus como SARS-CoV e SARS-CoV-2 para facilitar a infecção, e por bactérias como N. gonorrhoeae.
• Defeitos genéticos no SMPD1 levam à doença de Niemann-Pick, uma doença de depósito lisossomal caracterizada pelo acúmulo de esfingomielina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre uma grande região central (aa 70-340) do SMPD1 humano, sugerindo que o anticorpo pode reconhecer tanto as formas precursoras quanto as maduras. Considere o uso de inibidores de protease durante o preparo da amostra para manter a integridade da proteína de comprimento total.
• Para Western blot, é esperada uma banda em torno de 70 kDa. Verifique a especificidade usando controles positivos apropriados (por exemplo, lisados celulares humanos, de camundongo ou rato conhecidos por expressar SMPD1) e inclua controles negativos.
• Na imunofluorescência/ICC, a marcação pode ser observada em compartimentos lisossomais; recomenda-se co-marcação com marcadores lisossomais para confirmar a localização.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com camundongo e rato; portanto, pode ser usado em estudos com modelos de roedores, mas sempre valide no contexto da espécie e tecido relevantes.
• Protocolos de ELISA devem ser otimizados com proteína SMPD1 recombinante ou antígenos de revestimento apropriados; considere emparelhar com anticorpos de detecção correspondentes para ELISA sanduíche.

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