Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-SMPD3 para WB e ELISA - Q9NY59

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SMPD3

• O gene SMPD3 codifica a esfingomielinase neutra 2 (nSMase2), que hidrolisa a esfingomielina para gerar o lipídio bioativo ceramida e fosfocolina.
• A ceramida produzida pela SMPD3 media a apoptose celular e a parada do crescimento, sendo que a enzima pode regular esses dois processos de forma independente.
• A SMPD3 funciona como supressor de crescimento em células confluentes, regulando assim o ciclo celular.
• A SMPD3 desempenha um papel crítico no desenvolvimento pós-natal, contribuindo para a mineralização do osso e da dentina. Referências relacionadas: PMID:10823942 PMID:14741383 PMID:15051724
• A SMPD3 também hidrolisa a esfingosilfosfocolina e se liga a fosfolipídios aniônicos como a fosfatidilserina e o ácido fosfatídico, que modulam sua atividade e localização subcelular.
• Em nível subcelular, a SMPD3 se localiza na membrana do aparelho de Golgi e na membrana celular.
• A SMPD3 sofre splicing alternativo para produzir múltiplas variantes de transcritos.
• Expressa predominantemente no cérebro, a SMPD3 pode estar envolvida na ativação de JNK induzida por IL-1β em hepatócitos e na regulação mediada por NF-κB de NOS2/iNOS em condições inflamatórias (Por similaridade).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região C-terminal (aa 416-655), que pode conferir especificidade para isoformas; valide a especificidade do anticorpo usando bloqueio com peptídeo ou controles de knockdown para o seu sistema alvo.
• Para Western blot, a banda esperada está em ~71 kDa. Otimize as condições de carga de proteína e bloqueio, e use lisados de tecido cerebral (humano, camundongo ou rato) como controle positivo, dada a alta expressão no cérebro.
• Em aplicações de ELISA, realize diluições seriadas do anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal; inclua a proteína SMPD3 recombinante como controle positivo.
• A palmitoilção da SMPD3 (conforme indicado pela UniProt) pode influenciar a migração ou a ligação do anticorpo; condições desnaturantes e redutoras devem ser mantidas durante a preparação da amostra.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é relatada; no entanto, verifique os padrões de coloração em modelos de knockout ou superexpressão para garantir a especificidade.

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