Anticorpo policlonal de coelho anti-SOD2 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04179

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: Superóxido dismutase [Mn], função e localização mitocondriais

• SOD2 codifica a superóxido dismutase [Mn], uma enzima da matriz mitocondrial que catalisa a dismutação dos radicais superóxido em oxigênio e peróxido de hidrogênio, atuando como uma defesa antioxidante primária.
• A enzima requer manganês como cofator para sua atividade catalítica, conforme indicado pela palavra-chave Metal-binding.
• SOD2 é sintetizada como um precursor com um peptídeo de trânsito, que direciona sua importação para as mitocôndrias, onde é clivado para produzir a forma madura e ativa (conforme indicado pela palavra-chave Transit peptide).
• Subcelularmente, SOD2 localiza-se especificamente na matriz mitocondrial, de acordo com seu papel na proteção das mitocôndrias contra danos oxidativos.
• A proteína está sujeita a várias modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, nitração e conjugação semelhante à ubiquitina (das palavras-chave: Acetylation, Nitration, Ubl conjugation), que podem modular sua atividade, estabilidade ou funções de sinalização.
• O splicing alternativo do gene SOD2 produz múltiplas variantes de transcritos (a partir da palavra-chave Alternative splicing), contribuindo potencialmente para a diversidade de isoformas e a regulação específica dos tecidos.
• Como uma enzima antioxidante crítica, SOD2 está envolvida nas respostas celulares ao estresse oxidativo, e sua desregulação está associada a várias doenças, incluindo distúrbios neurodegenerativos e câncer.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um fragmento recombinante correspondente aos aminoácidos 25-222, que abrange a região madura da SOD2; ele pode detectar tanto as formas precursora quanto madura, dependendo da preparação da amostra e da exposição do epítopo.
• Na análise por Western blot, espera-se que o anticorpo detecte uma banda de aproximadamente 25 kDa correspondente à proteína SOD2 madura; em alguns lisados celulares ou teciduais, também pode ser observada uma banda de maior peso molecular representando o precursor.
• Na imuno-histoquímica e na imunofluorescência, os padrões de marcação mitocondrial devem ser verificados; considere a realização de dupla marcação com um marcador mitocondrial para confirmar a especificidade.
• Recomenda-se a pré-validação das condições de recuperação antigênica e fixação para obter resultados ideais em IHC-P ou IF/ICC, pois a localização da SOD2 pode ser afetada pelo processamento.
• Os protocolos de ELISA podem ser desenvolvidos utilizando o imunógeno recombinante como padrão, mas a reatividade cruzada com outras isoformas de SOD (por exemplo, SOD1 e SOD3) deve ser avaliada para garantir a especificidade do ensaio.
• Devido à alta homologia de sequência entre as SOD2 humana, de camundongo e de rato, espera-se que o anticorpo apresente reatividade cruzada com as três espécies, conforme indicado; contudo, recomenda-se confirmar a reatividade no sistema experimental específico.

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