Anticorpo policlonal de coelho anti-Sonic Hedgehog (Shh) para WB, IF/ICC, ELISA - Q15465

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Sonic Hedgehog (Shh)

• A proteína Sonic hedgehog (Shh), codificada pelo gene SHH, é um precursor de morfógeno com alcunhas que incluem HHG-1 e ShhNC. Ela pertence à família Hedgehog de moléculas de sinalização do desenvolvimento.
• O precursor de comprimento total sofre autoproteólise e atividade de transferência de colesterol no retículo endoplasmático, clivando-se no domínio de sinalização N-terminal (ShhN) e no fragmento C-terminal (ShhC), com colesterol ligado à ShhN. Referências relacionadas: PMID:29954986 PMID:29995851 PMID:30139912
• A ShhN duplamente lipidada atua como morfógeno ao se ligar ao receptor Patched (PTCH1/PTCH2), aliviando a inibição da Smoothened (SMO) e, assim, ativando a via de sinalização da SMO e a transcrição de genes-alvo a jusante. Referências relacionadas: PMID:10753901 PMID:24522195 PMID:24863049 PMID:29995851 PMID:31548691
• A Shh é essencial para diversos processos do desenvolvimento, incluindo a padronização do sistema nervoso central, a formação do eixo anteroposterior dos brotos dos membros, a especificação do destino celular ventral do tubo neural e dos somitos e a orientação dos axônios.
• Subcelularmente, a Shh localiza-se na membrana do retículo endoplasmático e na membrana do aparelho de Golgi, sendo secretada para o espaço extracelular; ela também se associa à membrana celular por meio de suas modificações lipídicas.
• As principais palavras-chave incluem clivagem autocatalítica, ligação ao cálcio, proteína do desenvolvimento, variantes associadas a doenças (holoprosencefalia, microftalmia), glicoproteína, lipoproteína e ligação ao zinco.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Devido ao processamento do precursor Shh em ShhN e ShhC, a análise por Western blot pode detectar várias bandas; anticorpos produzidos contra a região C-terminal (aa 231-330) podem reconhecer tanto o precursor de comprimento total (~50 kDa) quanto possivelmente os fragmentos processados.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica, o sinal pode ser observado na membrana plasmática, no aparelho de Golgi ou no retículo endoplasmático, refletindo o tráfego e a secreção da proteína. Recomenda-se a co coloração com marcadores de organelas para uma localização precisa.
• Este anticorpo policlonal, produzido em coelho com um peptídeo sintético como imunógeno, pode apresentar variabilidade entre lotes; inclua controles positivos e negativos apropriados em cada experimento.
• Embora validada para amostras humanas, a reatividade cruzada com outras espécies não foi testada; verifique a reatividade no sistema modelo relevante ao utilizar amostras não humanas.

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