Anticorpo Policlonal Anti-SPAG5 para IF/ICC, ELISA - Q96R06

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SPAG5

• SPAG5 (Antígeno 5 associado ao espermatozoide), também conhecida como Astrin, Deepest e MAP126, é uma proteína de 134 kDa altamente expressa no testículo. Localiza-se no citoplasma, fuso mitótico, polos do fuso, cinetócoros, corpo médio e centrossomos.
• Componente essencial do fuso mitótico necessário para a segregação cromossômica normal e progressão para a anáfase. Referências relacionadas: PMID:11724960, PMID:12356910, PMID:27462074
• Necessária para o alinhamento cromossômico, cronometragem normal da segregação das cromátides irmãs e manutenção da arquitetura dos polos do fuso. Referências relacionadas: PMID:17664331, PMID:27462074
• Em complexo com SKAP, promove anexações estáveis de microtúbulos aos cinetócoros e pode regular a atividade da separase.
• Pode regular a localização da AURKA no fuso mitótico e a localização da CCNB1 tanto no fuso quanto nos centrossomos. Referências relacionadas: PMID:18361916, PMID:21402792
• Envolvida na duplicação do centríolo; necessária para a localização centrosomal de CDK5RAP2, CEP152, WDR62 e CEP63, e promove a localização centrosomal de CDK2. Referências relacionadas: PMID:26297806
• Em células não mitóticas, inibe o mTORC1 recrutando RPTOR para grânulos de estresse sob estresse, prevenindo apoptose induzida por hiperativação do mTORC1. Referências relacionadas: PMID:23953116
• Pode potencializar a fosforilação mediada por GSK3B de substratos como MAPT/TAU. Referências relacionadas: PMID:18055457

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 1-300 da SPAG5 humana, o que pode gerar anticorpos direcionados a múltiplos epítopos ao longo da região N-terminal.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), considere usar células mitóticas (por exemplo, HeLa ou U2OS sincronizadas com nocodazol) para visualizar a localização no fuso e nos cinetócoros. Otimize os protocolos de fixação/permeabilização para preservar a estrutura do fuso.
• Para ELISA, proteína SPAG5 recombinante ou lisados celulares de testículo ou células mitoticamente ativas podem servir como controles positivos. Realize titulação do anticorpo para determinar a diluição de trabalho ideal.
• Valide a especificidade do anticorpo no sistema de amostra relevante (por exemplo, knockdown por siRNA ou knockout por CRISPR) para confirmar a detecção específica da SPAG5.

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