Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-SPAM1 para WB, IHC-P, ELISA - P38567

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SPAM1

• SPAM1 (molécula 1 de adesão espermática), também denominada hialuronidase PH-20, hialuronoglucosaminidase PH-20 ou proteína de superfície espermática PH-20, é uma glicoproteína de membrana ancorada por glicosilfosfatidilinositol (GPI).
• Funciona como uma hialuronidase, digerindo enzimaticamente o ácido hialurônico na matriz das células do cúmulo que circunda o oócito, facilitando assim a penetração do espermatozoide durante a fertilização.
• A SPAM1 é essencial para a adesão espermatozoide-óvulo, mediando o contato inicial entre o espermatozoide e o complexo cúmulo-oócito.
• Como membro da família das hialuronidases, é classificada como uma glicosidase (hidrolase) especializada na degradação do ácido hialurônico.
• A proteína localiza-se na membrana da célula espermática e é expressa especificamente nos testículos.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N, formação de pontes dissulfeto e uma âncora GPI que a fixa à membrana.
• O splicing alternativo origina múltiplas isoformas, potencialmente ampliando seu repertório funcional.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma sequência interna (aa 61–223) da SPAM1 humana; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça a SPAM1 de comprimento total e as isoformas que incluem essa região.
• Para Western blot, considere utilizar lisado de testículo humano ou extrato proteico de espermatozoides como controle positivo, devido à expressão específica do tecido; o peso molecular previsto é de aproximadamente 58 kDa, embora a glicosilação possa causar uma alteração na migração.
• Na imuno-histoquímica de seções incluídas em parafina (IHC-P), otimize a recuperação antigênica e valide a reatividade em tecido testicular humano.
• Para aplicações de ELISA, utilize proteína SPAM1 recombinante ou lisados celulares que expressem o alvo para revestimento ou detecção.
• A reatividade cruzada com rato sugere conservação do epítopo; confirme a adequação para amostras de rato por meio de alinhamento de sequências e validação experimental.

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