Anticorpo Policlonal Anti-SPHK1 para IHC-P, ELISA - Q9NYA1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SPHK1

• A SPHK1, também conhecida como SPHK, é uma esfingosina quinase que catalisa a fosforilação da esfingosina para formar esfingosina-1-fosfato (S1P), um mediador lipídico chave com funções intra e extracelulares (PubMed:11923095, PubMed:20577214, PubMed:23602659). Referências relacionadas: PMID:11923095, PMID:20577214, PMID:23602659
• Em contraste com a SPHK2 proapoptótica, a SPHK1 promove o crescimento celular e inibe a apoptose, e também participa no tráfego de membrana endocítica e na maturação endossomal independentemente de sua atividade quinase (PubMed:16118219, PubMed:24929359, PubMed:28049734). Referências relacionadas: PMID:16118219, PMID:24929359, PMID:28049734
• Através do S1P, a SPHK1 estimula a atividade da ligase E3 de ubiquitina TRAF2 e promove a ativação do NF-kappa-B em resposta à sinalização do TNF, levando à secreção de IL-17; também regula negativamente a indução de RANTES via via da p38 MAPK (PubMed:20577214, PubMed:23935096). Referências relacionadas: PMID:20577214, PMID:23935096
• Além disso, a SPHK1 tem atividade de serina acetiltransferase na PTGS2/COX2, que é aumentada pela esfingosina, e promove a secreção neuronal de mediadores especializados pró-resolução durante a neuroinflamação.
• Subcelularmente, a SPHK1 localiza-se no citoplasma, núcleo, membrana celular, membrana endossomal, invaginações revestidas por clatrina e sinapse.
• A SPHK1 é amplamente expressa, com níveis mais altos no fígado, rim, coração e músculo esquelético adultos, e também é detectada no córtex cerebral ao nível de proteína.
• Palavras-chave destacam seus papéis no metabolismo lipídico, ligação à calmodulina, fosforilação e splicing alternativo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um peptídeo sintético abrangendo os aminoácidos 201-300 da SPHK1 humana (NP_001136074.1). Anticorpos policlonais gerados contra esta região podem reconhecer múltiplos isoformas ou formas pós-traducionalmente modificadas; pesquisadores devem verificar a especificidade em seu contexto experimental.
• Para IHC-P, considere usar tecidos com alta expressão de SPHK1 (por exemplo, fígado ou rim) como controles positivos, e otimize a recuperação antigênica e a diluição do anticorpo empiricamente.
• No ELISA, o anticorpo pode ser usado para detectar SPHK1 em lisados celulares ou preparações de proteína recombinante; condições adequadas de bloqueio e lavagem devem ser determinadas.
• Reatividade cruzada foi relatada com camundongo e rato, mas a homologia de sequência da região do imunógeno nessas espécies deve ser verificada para confirmar o reconhecimento esperado.
• Como um anticorpo policlonal, pode ser adequado para detectar SPHK1 desnaturada ou nativa, mas condições de desnaturação para Western blot podem não ser ideais dadas as limitações de aplicação; se tentar outras aplicações, validação é necessária.

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