Anticorpo Policlonal Anti-SPHK1 de Coelho para WB e ELISA - Q9NYA1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Esfingosina Quinase 1

• O SPHK1 catalisa a fosforilação da esfingosina para formar esfingosina-1-fosfato (S1P), um mediador lipídico com funções intra e extracelulares. Também atua na D-eritro-esfingosina e, em menor extensão, na esfinganina, mas não em outros lipídios como diacilglicerol, ceramida ou fosfatidilinositol. Referências relacionadas: PMID:11923095 PMID:20577214 PMID:23602659
• Em contraste com o SPHK2 pró-apoptótico, o SPHK1 tem um efeito negativo sobre os níveis intracelulares de ceramida, aumenta o crescimento celular e inibe a apoptose. Referências relacionadas: PMID:16118219
• Através de seu produto S1P, o SPHK1 estimula a atividade da ligase E3 de ubiquitina TRAF2 e promove a ativação de NF-kappa-B em resposta à sinalização de TNF, levando à secreção de IL17. Referências relacionadas: PMID:20577214
• Em resposta ao TNF, o SPHK1 regula negativamente a indução de RANTES através da via de sinalização p38 MAPK. Referências relacionadas: PMID:23935096
• O SPHK1 está envolvido no tráfego de membrana endocítica, recrutado para endossomos dilatados, e desempenha um papel nos estágios posteriores da maturação endossomal e fusão de membranas independentemente de sua atividade de quinase. Referências relacionadas: PMID:24929359 PMID:28049734
• Nas células de Purkinje, o SPHK1 está envolvido na regulação da fusão de autofagossoma-lisossoma em resposta ao VEGFA. Referências relacionadas: PMID:25417698
• O SPHK1 também exibe atividade de serina acetiltransferase na PTGS2/COX2 de maneira dependente de acetil-CoA, modulando a neuroinflamação ao promover a secreção neuronal de mediadores pró-resolução especializados.
• A localização subcelular inclui citoplasma, núcleo, membrana celular, membrana endossomal, fossetas revestidas de clatrina e sinapse.
• Amplamente expresso, com os níveis mais altos no fígado, rim, coração e músculo esquelético de adultos; também expresso no córtex cerebral. Referências relacionadas: PMID:29662056

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 50-384 do SPHK1 humano, que inclui o domínio catalítico. Para Western blot, considere um peso molecular previsto de aproximadamente 43 kDa. Valide a especificidade do anticorpo usando lisatos de tecidos humanos ou de camundongo apropriados, pois a reatividade cruzada é relatada para ambas as espécies.
• Para ELISA, otimize a concentração de revestimento do anticorpo e as condições do ensaio. Considere usar a proteína SPHK1 recombinante como controle positivo.
• Como o SPHK1 está envolvido em múltiplas vias de sinalização, verifique a detecção sob condições de estimulação relevantes (por exemplo, tratamento com TNF) para avaliar o contexto funcional.

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