Anticorpo Policlonal Anti-SPHK2 para WB e ELISA - Q9NRA0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da SPHK2

• A SPHK2 (SK2) é uma esfingosina quinase que catalisa a fosforilação da esfingosina em esfingosina-1-fosfato (S1P). Também atua na D-eritro-di-hidroesfingosina, D-eritro-esfingosina e L-treo-di-hidroesfingosina, e liga-se a fosfoinositídeos. Referências relacionadas: PMID:12954646, PMID:19168031
• Ao contrário da SPHK1, que promove a sobrevivência, a SPHK2 regula positivamente os níveis intracelulares de ceramida, inibe o crescimento celular e aumenta a apoptose. Referências relacionadas: PMID:16118219
• Nas mitocôndrias, a S1P gerada pela SPHK2 liga-se à PHB2 para modular a montagem da citocromo-c oxidase e a respiração mitocondrial através do complexo IV. Referências relacionadas: PMID:20959514
• A SPHK2 nuclear interage com HDAC1 e HDAC2; a produção de S1P inibe sua atividade desacetilase, levando ao aumento da acetilação das histonas H3-K9, H4-K5 e H2B-K12, regulando assim a expressão gênica epigenética. Referências relacionadas: PMID:19729656
• No núcleo, a SPHK2 pode suprimir a síntese de DNA e a progressão do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:12954646, PMID:16103110
• A SPHK2 localiza-se em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo citoplasma, núcleo, retículo endoplasmático, membrana mitocondrial interna e membrana lisossômica.
• É altamente expressa no rim, fígado e cérebro adultos, com enriquecimento no córtex cerebral e hipocampo; a isoforma 1 predomina na maioria dos tecidos. Referências relacionadas: PMID:10751414, PMID:29615132, PMID:16103110

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1-165, uma região N-terminal; considere que este anticorpo pode detectar a SPHK2 de comprimento total (~69kDa) e possivelmente isoformas que contenham o N-terminal. Valide a especificidade no sistema de amostra relevante.
• Para Western blotting, lisados de rim, fígado ou cérebro humanos são controles positivos recomendados, dado o padrão de alta expressão; amostras de camundongo também podem ser testadas para confirmar a reatividade cruzada.
• Dadas as múltiplas localizações subcelulares da SPHK2, considere condições adequadas de fracionamento subcelular ou tratamento ao analisar a distribuição da proteína.
• Para aplicações em ELISA, considere a otimização do par de anticorpos e das condições do ensaio; este policlonal pode ser usado como reagente de captura ou detecção em um formato de ELISA sanduíche com a devida validação.

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